辽宁省本溪满族自治县高中生物 细胞工程知识点.docVIP

专题2??细胞工程 （一）植物细胞工程????? 1.植物组织培养技术 （1）原理：植物细胞的全能性? （2）过程：离体的植物器官、组织或细胞→脱分化→?愈伤组织→?再分化→??植物体? 常用的植物激素生长素和细胞分裂素。? （3）用途：微型繁殖、作物脱毒（选材应该选择茎尖组织：原因是病毒很少，甚至无毒）、制造人工种子、单倍体育种（最大的优点是明显缩短育种年限，得到的全为纯种）、筛选突变体、细胞产物的工厂化生产。? 2.植物体细胞杂交技术? （1）原理：细胞膜的流动性、植物细胞的全能性 去壁的方法：酶解法；（纤维素酶和果胶酶） 诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电激等。化学法是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。? （3）意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。? （二）动物细胞工程??? 动物细胞工程中常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等，其中，动物细胞培养是其他技术的基础。 ?1.动物细胞培养? （1）流程：取动物组织块→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。? （2）悬液中分散的细胞很快就贴服在瓶壁上，称为细胞贴壁。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞接触抑制。? （3）动物细胞培养需要满足以下条件? ①无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。? ②营养：培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐等。通常需加血清、血浆等天然成分。? ③温度和PH：适宜温度：哺乳动物多是36.5℃＋0.5℃；pH：7.2～7.4。? ④气体环境：95%空气＋5%?CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。? （4）动物细胞培养技术的应用：制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质。? 2.动物体细胞核移植技术和克隆动物 2.动物体细胞核移植技术和克隆动物? （1）哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植（比较容易）和体细胞核移植（比较难）。? （2）选用去核卵母细胞的原因：比较大，容易操作；细胞质多，营养丰富；含有多种促进细胞发挥全能性的物质。? （3）体细胞核移植的大致过程是：（书本P74）? 3.动物细胞融合? （1）动物细胞融合也称细胞杂交，原理是细胞膜的流动性。? （2）诱导动物细胞融合方法与植物原生质体融合方法类似，常用的诱导因素有PEG、灭活的病毒、电激等。? （3）动物细胞融合的意义：克服了远缘杂交的不亲和的障碍，成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育的重要手段。? 4.单克隆抗体?? （1）单克隆抗体的制备过程：? ???? （2）杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生专一的抗体。? （3）单克隆抗体的优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。? （4）单克隆抗体的作用：①?作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质的细微差异，并跟一定抗原发生特异性结合，具有准确、高效、简易、快速的优点。? ②?用于治疗疾病和运载药物：可制成“生物导弹”，将药物定向带到癌细胞所在位置。 1