实验七 接种-13.pptVIP

实验七 植物病原物的接种 实验目的  人工使病原物与寄主植物感病部位接触，创造条件使病原物侵入并诱致寄主发病叫接种。 接种是植病工作者必须掌握的基本技术环节。 植物病害人工接种方法，是根据病害的传染方式和侵染途径设计的，植物病害的种类很多、其传染方式和侵染途径各异。因此接种方法也不相同。本次实验以番茄灰霉病为内容学习常用的接种方法。 材料与用具 材料:番茄灰霉病菌,番茄果实 用具:酒精灯,小烧杯,灭菌水,解剖刀,镊子,火柴,表面消毒液(0.1%升汞、70%酒精),盛废水的大烧杯,纱布等。 内容和方法 取番茄果实用70%酒精表面消毒 解剖刀在酒精火焰表面消毒后, 在番茄果实上划“十”字小口。 用挑针挑取经分离纯化的番茄灰霉病菌填抹在已切好的番茄果实上。 放在密封的保湿盒中，保湿盒底部装些水或湿润消毒纱布。放于25℃的温箱中。 以未接菌的作为对照，3天后作发病调查。 为了及时正确地分析总结试验结果，必须认真观察并做详尽的记录，如：记录接种时间/接种植物、接种方法、部位、接种用的病菌名称、来源、繁殖和培养方法、接种体浓度、接种的方法和步骤及接种后的管理等。 作业 植物接种常用的方法有哪些? 举例说明如何根据病害特点选择接种方法?  (一)拌土法 ----------- (小麦根腐病) 拌土法适于土壤传染的病害。 方法是将消毒的土壤分别装入两个小花盆中，其中一盆表层覆以一厘米厚的菌土，菌土是用玉米砂培养菌1份加消毒土5份混合而成，另一盆不接种(不覆菌土)作为对照。将经0.1%升汞表面消毒3分钟并用无菌水洗3次的小麦种子，分别播种在两个花盆内，插上标牌，注明接种日期，方法病害名称及接种人姓名，花盆放在室温下，浇水保湿，遮阴管理，待幼苗出土展开叶子后(大约一周)，观察并记载根腐病发生情况。 (二)喷雾法------------(玉米大斑病) 气流及雨水传播的病害常用此法接种。 将培养好的玉米大斑病的斜面菌种一支，用移植钩刮于装有100毫升无菌水的三角瓶中，用力振荡，待孢子洗下后，以纱布过滤，并于滤液中加入0.1克中性肥皂，即成孢子菌丝悬液，用卫生喷雾器均匀喷布在麦苗上。同时设一不喷菌液而喷无菌水的作对照，用塑料罩保湿48小时，揭布后正常管理，7天后作发病调查。 (三)涂抹法------------(小麦秆锈病) 这也是气流传播的病害常用的接种方法，用于禾本科锈病接种。 方法是用姆指沾锈菌夏孢子悬液自下向上轻轻涂欲接种的小麦叶片，也可先用手指沾水摩擦叶片，使叶表有一层水膜，然后将夏孢子粉抹在上面，以不涂抹孢子悬液或孢子粉的作为对照。塑料罩保湿48小时后揭布，正常管理，7天后作发病调查。 (四)创伤接种法------(白菜软腐病及梨褐腐病) 创伤接种法是伤口侵入的弱寄生菌常用的接种方法。 1.白菜软腐病：取切成适当大小的白菜帮两块、经水洗，待水稍干后，以10%漂白粉溶液作表面消毒，分放在两个灭过菌的上下铺有吸水纸的培养皿中，用酒精擦过的玻璃棒顺着白菜帮打三排不穿透的孔穴。将培养好的白菜软腐病菌斜面菌种的菌苔以无菌水洗下作成菌悬液。然后，先以灭过菌的兽用注射器吸取无菌水滴于菜帮的第一排内孔作为对照，再用该注射器吸菌液滴于第二、三排孔内。注意无论无菌水、还是菌液都不要滴的过多,以免流出孔穴。盖好皿盖，置于26—28℃的温箱中，24小时后检查发病情况。 2.梨褐腐病：取白梨以酒精火焰表面消毒后，用炽热的解剖刀，在其上切成小手指粗的孔穴3—5个。取经分离纯化的梨褐腐病菌菌落填抹在已切好的孔穴中，再复以饱含无菌水的脱脂棉或纱布，放在密封的干燥器或标本瓶中，干燥器或标本瓶底部装些水，再将干燥器或标本瓶放于25℃的温箱中，以未接菌的作为对照，3天后作发病调查。 * * 接种试验结果的观察和记载