用agilentbio-monolithqa柱快速测定细胞培养液中的igm并监测.pdfVIP

下载本文档

20
0
约4.74千字
约 4页
2018-08-19 发布于天津
举报
版权申诉

用agilentbio-monolithqa柱快速测定细胞培养液中的igm并监测.pdf

1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

用 Agilent Bio-Monolith QA 柱快速测定细胞培养液中的 IgM 并监测纯化过程应用报告生物制药摘要目前，许多 IgM 单克隆抗体被开发用于治疗自身免疫病、感染性疾病、癌症。人们对这些生物大分子越来越关注，需要建立精确、快速和简便的 IgM 分析方法，以测定细胞培养液中 IgM 的浓度，测定色谱馏分中 IgM 和蛋白污染物的分布等。在 IgG 单克隆抗体的相关应用中可以使用高效蛋白 A 柱，但由于 IgM 类分子在洗脱大多数亲和配基所需的极端条件下容易发生变性，必须开发其它方法。IgM 单克隆抗体在阳离子交换树脂、阴离子交换树脂或混合树脂上都能保留，所以离子交换色谱法是这类应用的有利候选方法。本研究用 Agilent Bio- Monolith QA 柱（强阴离子交换）监测 IgM 纯化过程，并定量测定了细胞培养上清液中的 IgM 浓度。引言 40 用安捷伦生物 HPLC 整体柱进行高速分离证明，可以用整体柱分析方法监测色谱馏分中的产物和污染物分布。数据表明，柱法与聚丙烯酰胺 Agilent Bio-Monolith HPLC PAGE 凝胶电泳或免疫分析法相比，可以更快速地对 IgM 纯化过程进行监测。这些数据对早期开发中的纯化工艺鉴定和后来的工艺验证 A （图）都很有意义。该方法的灵敏度、线性，准确度和分析速度 1 也非常适用于细胞培养上清液中 IgM 的定量分析（图 2）。 mAU B 实验部分条件 C 色谱柱： Agilent Bio-Monolith QA 部件号 5069-3635 5.2 mm id × 4.95 mm D 流动相 A ： 10 mM 磷酸钠，pH 7.0 流动相 B： 250 mM 磷酸钠，pH 7.0 E 10 分钟内从 A 到 B 进行线性梯度洗脱（20 mL） 0 检测： UV 280 nm 0 11 流速： 2 mL/min 图 1. 收集一系列羟基磷灰石色谱馏分（A 到 E），并用Agilent Bio-Monolith QA 分析柱进行分析馏分 A ：细胞培养上清液