基于树枝状化合物的聚合酶链反应-上海师范大学学报.pdfVIP

( ) 第 3 7卷 第 1期 　　　　　　　　　　　　　　　 上海师范大学学报 自然科学版 Vol. 3 7 , No. 1 ( ) 2 0 0 8 年 2 月　　　　　　 　　　　　Journal of Shanghai Norm al Un iversity N atu ral Sciences 2 0 0 8 , Feb . 基于树枝状化合物的聚合酶链反应 王 　超 ,沈鹤柏 ,周丽佳 ,杨仕平 (上海师范大学 生命与环境科学学院 , 上海 200234) ( ) 摘 　要 : 研究了基于树枝状化合物 PAMAM 界面的 PCR ,将引物通过静电作用连接到 PAM AM 分子的表面 ,采用质粒 pB lue scrip t SK 作为模板 ,进行 PCR ,并用琼脂糖凝胶电泳和透射电 子显微镜对 PCR 产物进行检测 ,分别研究了退火温度 、引物浓度对 PCR 的影响. 实验结果表 明:连接在 PAMAM 分子表面引物的 PCR 可以成功地进行 ,并且在一定温度范围里 , PCR 几乎 不受退火温度的影响;通过 PCR 制备了 PAMAM - DNA 的聚合体 ,这种聚合物在高温时能分 散 ,低温时能复合. 基于 PAMAM 分子表面的 PCR 将均相体系中的 PCR 技术扩展到非均相体 系中 ,大大扩展了 PCR 技术的应用范围 ,提供了一种制备纳米材料的新方法. 关键词 : 树枝状化合物 ;聚合酶链反应 ;琼脂糖凝胶电泳 ; PAMAM - DNA 聚合体 中图分类号 : O633. 22　　文献标识码 : A 　　文章编号 : (2008) 0 182 07 0　引　言 ( ) [ 1～5 ] 树形大分子 D endrim er 是近几年来人工合成的三维的、高度有序的新型纳米级高分子 ,这类 新型功能高分子的合成过程可以在分子水平上进行严格设计和控制分子的大小 、形状和功能基团[ 6 ] , 所以在结构上具有高度的几何对称性 、精确的分子结构 、大量的官能团、分子内存在空腔及分子链增长 具有可控性等特点. 因此引起了众多领域科学家的极大兴趣 ,成为高分子研究领域的热点之一. 聚酰胺 ( ) [ 7 ] - 胺 PAMAM 是合成的第一个树枝状高分子 ,通过反复的 M ichael加成和酰胺化反应可得到不同代 数的树状大分子. 这些分子的特定结构和表面大量的氨基基团有利于它们与抗体 [ 8 ] 、核酸 [ 9～11 ] 和荧光 基团[ 12 ]通过静电作用形成稳定的复合物 ,因此被广泛地应用于不同的生物学和医学领域 ,如基因载体 、 药物载体 、磁共振造影剂和硼中子俘获治疗试剂等方面 [ 13 ] . ( ) 可以预见 ,这类材料在医药学等领域具有潜在的应用价值. 聚合酶链反应 PCR 是一种体外特定核 酸序列扩增技术 , 是现代分子生物学的实验工作基础之一 , 在生命科学 、遗传学和医学 [ 14 ～17 ] 等领域发 挥着重要作用. 本课题组曾报道了在纳米粒子界面上的 PCR 和不对称 PCR 技术 [ 18, 19 ]