无菌原料药的无菌工艺验证.doc

无菌原料药的无菌工艺验证 摘要　叙述了无菌原料药的无菌工艺验证一般过程和注意事项,包括验证前的准备、验证的实施、最终报告和再验证。涉及人员培训、操作时限、模拟介质的选择和灭菌、环境监测、取样和样品培养等内容。 关键词　无菌原料药　无菌工艺验证　模拟介质　培养基　环境监测　最终报告　再验证 无菌原料药的生产通常是把精制过程和无菌过程结合在一起,将无菌过程作为生产工艺的一个单元操作来完成。有很多种方法可以使非无菌的原材料转化为无菌的原料药。目前生产上最常用的方法是无菌过滤法,即将非无菌的中间体或原材料配制成溶液,再通过0.22μ孔径的过滤器以达到除去细菌的目的,在以后用于精制的一系列单元操作中一直保持无菌,最后生产出符合无菌要求的原料药。 典型的无菌原料药精制生产工艺为:将原材料配制成溶液→除菌过滤→结晶→过滤→洗涤→干燥→粉碎→分装。 在上述的灭菌生产工艺中,除了除菌过滤外,还包括设备灭菌、包装材料灭菌、无菌衣物灭菌等等。这些灭菌过程经过验证能保证从非无菌状态转化成无菌状态。但是无菌原料药的生产过程是精制过程和上述这些灭菌过程的组合,或者称之为无菌工艺,这种无菌工艺只有经过验证才能确保产品的无菌性能可靠。验证过程一般是选择合适的介质模拟生产流程,使介质流经整个生产系统,然后对模拟介质培养,观察是否有细菌长出。如果系统中有染菌的因素存在,在对模拟介质的培养中就会被发现。 验证前的准备 无菌工艺验证是生产、质量、工程和其它部门之间广泛合作的一项工作。在验证之前需要做一些准备工作。 生产设施的设计和确认 生产设施的设计应能使潜在的污染降低到最小。生产设施应易于清洁和消毒;产品或物料敞开之处的空气要有一定的品质要求;温度和湿度的控制要适宜,使穿着无菌衣的操作人员感到舒适,应能防止污染和交叉污染等等。其中单一因素对无菌操作的具体影响也许并不是很明显,但如果设施设计不够全面,这种影响将非常显著。应重视设计上的细节,减少污染源,以确保无菌生产得以实施。无菌工艺验证是执行难度较大的验证之一,参与者应充分意识到设施的设计和确认是验证成功的主要因素。 公用工程的确认 影响产品质量的公用工程如蒸汽、压缩空气、加热、制冷、水系统等都应经过确认。公用工程是生产得以正常实施的保证之一。若其中任何一个系统出现故障,将会使产品发生潜在的或严重的污染。应有公用工程的维护计划并按计划执行,目的就是不让系统发生故障,保证生产的顺利进行,而不是发生故障后去修理。经常发生故障而被维修的公用工程是不能保证无菌生产的。 设备和工艺确认 在本验证实施之前,所有的设备、无菌环境、计算机控制系统以及生产工艺都应经过验证。产品暴露是发生污染使无菌工艺验证失败的主要原因之一,为防止或降低污染发生的几率,给暴露产品提供层流空气的百级层流罩是非常重要的;被灭菌过的物品由灭菌器到生产线的传递和经由必要的手工操作进入生产线前的保护也是至关重要的,应尽量避免人员对设备或物料的接触的操作。这些都应经过验证。 设备的清洗和灭菌 在无菌工艺验证之前接触模拟介质的设备表面应清洗灭菌,并防止灭菌后的再污染。若生产的药品具有抗菌性或者杀菌性,这种清洗尤为重要。若清洗或灭菌不彻底,残存的药品会使模拟介质受到污染或设备表面的微生物使模拟介质染菌而使验证失败。这种清洗和灭菌过程应经过验证,能保证清洗彻底和灭菌成功。 模拟介质的选择 选择的模拟介质应有如下特征:①没有抑菌作用。这是显而易见的,若模拟介质有抑菌作用,将会对生产系统中的细菌生长产生抑制作用,以至于不能培养出细菌,产生假的结果。模拟介质最好具有促进细菌生长的作用。如果选择对细菌生长有促进作用的固体培养介质做验证,对生产环境的保护则特别重要。因为如果有些操作是使介质暴露的,介质的尘粒会飘散在某些较难清洗的地方,如空调系统的送风口和回风口附近,给细菌在该处的滋生创造了条件,所以应有措施保护不易清洗的死角不被介质污染。②模拟介质还应在培养基内有较好的溶解度。因为若溶解性能不好,悬浮在培养基中的模拟介质使培养基发生混浊,影响结果的判断。③模拟介质加入培养基后,不应影响培养基的质量,ｐＨ不发生大的变化,以适应大多数细菌的生长。④对设备没有腐蚀性,对人体无害,对环境不发生污染。基于以上分析,通常可供选用的模拟介质有ＰＥＧ4000、ＰＥＧ6000、乳糖和甘露醇等。 培养基 一般来说,应针对不同的微生物选择不同的培养基,比如硫乙醇酸盐培养基适用于需氧菌和厌氧菌,大豆酪蛋白消化物培养基适用于需氧菌和真菌。在无菌工艺验证中事先不知道系统中存在什么样的微生物,但分别选择多种培养基分别做无菌测试也较难做到。应根据实际的生产工艺和生产环境选择适用于大多数微生物生长的培养基。比较之下,推荐用大豆酪蛋白消化物培养基,因为大多数无菌原料药的生产都和空气接触,污染厌氧菌的几率很小,而且