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分级提取蛋白技术在蛋白质组学中的应用
第8期(总第253期) 农产品加工·学刊 No．8
2011年8月 AcademicPeritHli(!alofFa兀nP兀M1ucts
PrDPessing Aug．
文章编号：1671—9646(2011)08一0044一05
分级提取蛋白技术在蛋白质组学中的应用
王维君
(天津市食品加—r工程中心天津科技大学，天津300457)
摘要：以小鼠急性肝脏氧化损伤为模型，通过采用不同浓度的丙酮对小鼠肝脏蛋白进行分级提取和沉淀，用sDs一聚
丙烯酰胺连续密度梯度凝胶电泳(sDs—PAGE)试验寻找差异表达蛋白质。通过试验发现，模型组中水溶性总蛋白、
非水溶性总蛋白和膜蛋白总体表达量较李白组均有明显降低，进而对水溶性总蛋}1进行的分级提取试验中发现有2个
蛋白条带具有最著的差异性。进一步以基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI—TOF—Ms)检测差异蛋白的肽
质量指纹，在蛋白质数据库中检索鉴定差异蛋白的种类，经鉴定两种差异蛋白分别为一种未命名蛋白和cu亿n超氧
化物歧化酶(cu／Znsupemxidedismutase)，为进一步研究其损伤机理奠定基础。通过分级提取蛋门质样品的试验方
法，降低了蛋白组学当中蛋白质分离的成本和技术难度，在保证蛋白纯度的同时提高了电泳的分辨率，电泳图中的
条带清晰、分明，便于后期进行质谱分析，同时也为蛋白质组学的应用提供了一种新思路和新方法。
关键词：蛋白质组学；蛋白质提取；sDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳
中图分类号：Q816 文献标志码：A doi：lo．3969，jissn．167l一9646(x)．2011．08．011
0f ExtractionProtein onProteomics
ApplicationSequential Technology
WangWeij衄
of ofScience蚰d
(f如d Center 300457，China)
PmcessingEn西neering Tianjin，TianjinUniversity Technology，Tianjin
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