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小白菜无性快繁体系建立 　　摘要：以四季小白菜（Brassica chinensis L.）和美国杂交小白菜为材料，建立了小白菜的无性快繁体系。结果表明，最佳的灭菌方法为用70%的乙醇处理30 s， 关键词：小白菜（Brassica chinensis L.）；灭菌方法；无性快繁体系 中图分类号：S634.3 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2014）02-0444-03 Establishment of the Asexual Rapid Propagation System of Pakchoi LIU Si-yan1a，QU Bo1a，GAO Wei2，XIA Hai-feng2，GUAN Shu-yan1a，YAO Dan1a，WANG Pi-wu1b （1a.College of Life Sciences；1b. College of Agronomy，Jilin Agricultural University，Changchun 130118，China； 2.Tonghua Academy of Agricultural Sciences，Meihekou 135007，Jilin，China） Abstract： Using the pakchoi of four seasons and hybrid pakchoi from the United States as materials， an asexual rapid propagation system of pakchoi was established. The results showed that the best seed sterilization method was 70% alcohol for 30 s， then sodium hypochlorite sterilization for 15 min. MS + 0.25 mg/L 6-BA + 0.5 mg/L NAA was the best for callus induction. MS + 3.0 mg/L 6-BA + 0.5 mg/L NAA was the best for budding induction. MS + 0.2 mg/L NAA was the best for root induction. Key words： pakchoi（Brassica chinensis L.）； sterilization method； asexual rapid propagation system 小白菜（Brassica chinensis L.），又称青菜，属十字花科芸苔属，叶不结球卵状匙形，叶柄有狭边。小白菜原产于我国，品种很多，由于其抗寒性很强，易贮藏和运输，是我国多数地区常见蔬菜之一[1]。随着分子生物学的发展，人们开始利用转基因技术对现有的蔬菜品种进行改良[2，3]，小白菜无性快繁方面的研究已经有了许多报道[4-12]。本试验以四季小白菜和美国杂交小白菜种子诱导出的无菌实生苗为材料，以MS为基本培养基，以6-BA及NAA为调节激素，优化最佳的种子灭菌时间、诱导愈伤组织的最佳激素浓度、诱导不定芽分化和生根的最佳激素浓度，为小白菜的转基因研究提供参考。 1 材料与方法 1.1 材料 试验采用四季小白菜和美国杂交小白菜的无菌实生苗为材料。 1.2 方法 1.2.1 无菌实生苗的获得 选取饱满、大小一致两种小白菜种子用清水浸泡备用。种子灭菌采用3种方法：①用70%的乙醇处理30 s，再用0.1%的升汞消毒10 min，无菌水冲洗3次。②用70%的乙醇处理30 s，再用3%的次氯酸钠消毒10 min，无菌水冲洗3次。③用70%的乙醇处理30 s，再用3%的次氯酸钠消毒15 min，无菌水冲洗3次。将以上灭菌消毒后的种子接种到MS培养基上，12 d后统计其出苗率、污染率。 1.2.2 愈伤组织的诱导 以无菌实生苗的叶片作为外植体材料，以MS培养基为基本培养基，分别添加不同浓度的NAA（0.4、0.5、0.6、0.7、0.8 mg/L）和6-BA（0.25 mg/L），进行愈伤组织的诱导，20 d后统计愈伤组织诱导率。 1.2.3 不定芽分化的诱导 以含芽原基的茎段为材料，以MS培养基为基本培养基，添加不同浓度的NAA（0.3、0.5、0.8 mg/L）和6-BA（3.0 mg/L）进行不定芽分化的诱导，15 d后统计不定芽分化率。 1.2.4 不定芽生根的诱导 将生长健壮的小白菜的无根苗，以MS培养基为基本培养基，添加不同浓度的NAA（0.1、