过氧化苯甲酰与微波对3种食用菌杂菌灭菌效果.docVIP

过氧化苯甲酰与微波对3种食用菌杂菌灭菌效果 　　摘 要：以在食用菌培养基中最常见的3种菌（大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、黑曲霉菌）作为消毒灭菌试验对象，用过氧化苯甲酰和微波及二者联合进行消毒灭菌效果试验，以检测其消毒灭菌效果。试验结果表明，随着微波时间的增加，菌的数量逐渐减少，微波时间为120 s时大肠杆菌全部被杀死，160 s时黑曲霉全部被杀死，180 s时枯草芽孢杆菌全部被杀死；随着过氧化苯甲酰浓度的升高，3种菌的数量均在减少，大肠杆菌与黑霉菌在浓度为10 000 mg/L时全部被杀死，枯草芽孢杆菌在浓度为20 000 mg/L时全部被杀死；在微波与过氧化苯甲酰共同作用试验中选用最难杀灭的枯草芽孢杆菌作为试验菌种，在过氧化苯甲酰浓度为1 000 mg/L、微波90 s时全部被杀死。 关键词：食用菌；微波时间；过氧化苯甲酰；消毒灭菌 中图分类号：S646 文献标识码：A 文章编号：1001-3547（2014）04-0063-04 随着消毒学的发展，消毒方法日益增多，一般分为物理法、化学法与生物法三大类。目前在我国使用较多的物理法有加热、过滤和各种辐射处理等；化学消毒法是利用化学药物杀灭病原微生物；生物消毒法是利用一些生物来杀灭或去除病原微生物，其作用缓慢、效果有限。微波消毒灭菌是近年来发展较快的一项新技术，已在食品工业和医药卫生领域的某些方面推广应用。本试验测定了微波不同作用时间下，食用菌3种常见杂菌的灭菌效率，并且与传统的高压蒸汽灭菌效果进行比较。在一般生产中，与目前的蒸汽灭菌方法相比，高温蒸汽灭菌[1]更节能、更快捷、更方便、更容易操作和控制[2～6]。 过氧化苯甲酰（Benzoyl Peroxide，BPO）为一种食品添加剂，主要用来使小麦粉增白，俗称面粉增白剂。过氧化苯甲酰可释放出原子态活性氧，破坏微生物新陈代谢相关酶的功能，使杂菌无法生存，因其具有杀菌防虫作用，故有利于面粉保管和储存[7]。本次试验主要采用过氧化苯甲酰作为灭菌的消毒剂，观测过氧化苯甲酰的灭菌效率，并将其与微波灭菌的效率比较，以探索最佳的灭菌浓度，寻求最优的灭菌方法。 1 材料与方法 1.1 菌种培养 ①大肠杆菌的培养 取冻存的大肠杆菌涂布于牛肉膏蛋白胨平板上，37℃培养24～48 h，挑取光滑的砖红色菌落接种至牛肉膏蛋白胨培养液中，37℃振荡培养18 h备用。 ②黑曲霉菌的培养 取冻存的木霉菌涂布于马铃薯葡萄糖平板上，37℃培养24～48 h，挑取活性菌落接种至马铃薯葡萄糖培养液中，37℃振荡培养18 h备用。 ③枯草芽孢杆菌的培养 取冻存的枯草芽孢杆菌涂布于LB培养平板上，37℃培养24～48 h，挑取活性菌落接种至LB培养液中，37℃振荡培养 18 h备用。 1.2 微波炉灭菌试验 每种液体培养基用500 mL，每种固体培养基用2 000 mL。 ①菌原液数量测定 取3种菌液5 mL分置于3支试管中，静置10 min后用稀释平板计数法计数，方法如下。 a.编号。取无菌培养皿分别用记号标明10-4、10-5、10-6各3套。另取6支盛有无菌水的试管，排于试管架上，依次标明10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6。 b.倒平板。将牛肉膏蛋白胨琼脂培养基融化后冷却至45°C左右倒入无菌平板，凝固后，倒置于37℃恒温箱中放置24 h，使其干燥备用。 c.稀释。用1 mL无菌吸管精确地吸取1 mL菌体悬液放入10-1的试管中，吸吹3次使其均匀，依次配制浓度10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6的菌液。 d.取样。用3支0.2 mL的无菌吸管分别从10-4、10-5、10-6的稀释液取0.2 mL菌液，对号放入无菌平皿中。 e.涂布。用3支0.2 mL的无菌吸管分别从10-4、10-5、10-6的稀释液中吸取0.2 mL菌液，再用无菌玻璃刮棒将菌液在平板上涂布均匀，放在实验台上20～30 min，使菌液渗透于培养基 37℃倒置培养 24 h。 f.计数。培养24 h的平板进行计数，算出同一稀释度3个平板上的菌落平均数，每1 mL活菌总数=同一稀释度3次重复的菌落平均数×稀释倍数×5。 ②取菌液 3种菌液中各取5 mL，分装于10支试管中。 ③密封 注意3种不同菌试管各用一种，保证每次作用强度一样。微波炉小火强度分别作用各管20，40，60，80，100，120，140，160，180，200 s。灭菌完成后放置10 min，采用稀释平板计数法计数。 ④重复以上步骤3次 放到培养箱中培养 24 h以后，照相并且记录数据。 1.3 过氧化苯甲酰消毒效果试验 ①菌原液细菌数量