中药药理实验方法学-2.ppt

药理实验实验方法学 第二讲 中药药理研究的基本知识（2） 第三节 实验设计 主要内容 五、实验数据的整理 一 基本原则 对照原则 随机原则 重复原则 根据余数分组鼠号： A组： 2 4 5 16 17 B组： 1 12 13 20 14 C组： 7 8 10 11 15 18 19 D组： 3 6 9 随机号（备用）： 58 24 82 03 47 24/7余数为3，即C组第3个动物（10号）编入D组。 根据余数分组鼠号： A组： 2 4 5 16 17 B组： 1 12 13 20 14 C组： 7 8 11 15 18 19 D组： 3 6 9 10 随机号（备用）： 58 24 82 03 47 82/ 6 余数为4，即C组第4个动物（15号）编入D组。 学生练习题一 30个小鼠，根据下例随机数顺序，将其随机分成5组。 取随机数字： 37 56 08 18 09 77 53 84 46 47 31 91 18 95 58 24 16 74 11 53 10 13 85 57 61 65 61 68 66 27 47 39 19 84 83 70 07 48 （3）分层随机 先将需严格控制的主要因素，如性别、体重等分为不同类别，或层次；在每一类别或层次中分别随机分成一定组。 将每一类别或层次随机分成的组,组次相同的分别合并。 二、实验对象 (一)、受试动物 1、按要求选择不同级别符合医学实验标准的动物 一级：普通动物（亦称常规动物或无疾病的动物）； 二级：清洁动物（饲养在温度恒定，普通设施中的动物，饲料、垫料，用具均经过高压消毒）； 组织胺：可引起豚鼠哮喘的发生，但对家兔引起的是血管的收缩和右心室功能的衰竭。 苯：家兔：白细胞减少及造血器官发育不全；犬：白细胞增多，脾脏和淋巴结增生。 7 实验条件控制 时辰：动物生理活动有其昼夜节律，如小鼠夜间活动增加，白天活动减少。最好每批实验在每天相同的时间测定。 环境温度：室温稳定、适宜。 饮食：有些实验需对动物禁食。 适应：3－7天。 （二） 受试药 1.制备情况 （1）新药受试药要求：用处方固定，质量稳定、工艺、质控指标恒定后的中试产品。 （2）一般受试中药：生药经鉴定，科属种清楚；提取制备工艺明确，含量确定。 （3）单体：化学结构式清楚。 （4）在注射给药或离体试验时应注意药物中杂质、不溶物质、无机离子及酸碱度等因素对实验的干扰。 2、给药途径 实验的给药途径与临床拟使用的途径一致。 中药粗制剂一般不用注射给药或体外实验的方法检测药物效应 。 3、给药时间及次数 最好每日固定同一个时间给药。 急性实验通常也需连续给药3-5天以上。 预防性给药： 治疗给药： 4 对照药 ①合法性：《中国药典》收载或符合部颁标准，或新批准合法生产的药物。 ②可比性：其功用、主治、剂型（给药途径）与受试药相似。特殊情况下，在合理范围内可适当灵活掌握。 ③择优选用：有多种同类药可供选用时，应择优选用公认疗效较好的药物。 三、效应指标 观测指标应选用特异性强、敏感性高、重现性好，客观、定量或半定量的指标进行观测。 四、剂量设计 剂量的表示方法：g/kg, mg/kg, ml/kg, （中药） g生药/kg 例如： 1、取50g远志，水提浓缩后为50ml。灌胃给予小鼠，给药容量为0.2ml/10g体重，计算远志的给药剂量。 2、100%大黄水煎液，灌胃给予大鼠，给药容量1ml/100g体重，计算大黄的给药剂量。 剂量组数：新药研究至少设3个剂量组。 三者最好成等比，能反应量效关系。 给药容量相等，浓度不等。 合理选择剂量： （1）参考LD50：在LD50的1/10、1/20、1/40等范围内设置高、中、低剂量组。 （2）根据临床用药等效量计算 不同种类动物间用药剂量换算表（转换因子 计算法） 某利尿中药,250g重大鼠的有效量为250 mg/kg，试计算15kg犬的等效实验剂量？ 犬的等效实验剂量 ＝ 250 mg/kg×6.9÷22 =78.4mg/kg 药物溶液配置 例：戊巴比妥钠对小鼠腹腔注射的有效麻醉剂量为40mg/kg。现有体重为20g左右的30只小鼠要麻醉。试问要称量多少克的戊巴比妥钠，设计的给药容量为多少，配成怎样浓度？ 药物溶液