二氧化硫对小鼠不同组织器官的氧化损伤作用SOlt2gt是一种全身性毒物研究.pdfVIP

二氧化硫对小鼠不同组织器官的氧化损伤作用： s0：是一种全身性毒物 孟紫强张波秦国华 山西大学环境医学与毒理学研究所 山西大学生命科学与技术学院 太原030006 摘要 对小鼠进行二氧化硫(SO：)染毒处理，测定s0。吸入后6种脏器(脑、肺、心、肝、脾、肾) (1)SOz吸入引起所有所试脏器抗氧化酶活性降低，GSH含量下降及脂质过氧化作用升高；(2)SO。对 小同脏器引起的氧化损伤程度不同，存在器官差异．尤其以脑、心、肝、肺更为严重；(3)雌、雄有 一定差别。由此得出结论：(I)通过过氧自由基引起组织细胞的氧化损伤可能是sO。毒理作用的主要机 制；(2)SO：是一种全身性毒物，它可能引起多种组织器官损伤和疾病。 关键词 一氧化硫氧化损伤 脂质过氧化作用 全身性毒物小鼠 二氧化硫(S02)是当前主要大气污染物，对人体健康危害甚大。一般认为S02对呼吸 道粘膜有腐蚀和刺激作用，可引起气道阻塞性疾病，如气管炎、哮喘、肺气肿等多种呼 吸道疾病，甚至与肺癌的发生有关…，因此，人们更多的是关注它对呼吸系统的危害， 至于S02对机体其它多种器官、系统有无危害作用，却往往被忽视，迄今未见文献报道。 此外，S02被吸入体内以后，经过代谢转化可形成各种硫中心自由基和氧中心自由基， 并导致超氧阴离子自由基的形成。最近本室研究表明S02吸入可引起大鼠脑组织和红细 胞SOD酶活性下降、脂质过氧化作用增高¨。J，设想这些自由基可引起机体氧化损伤作 用，从而造成S02各种毒理作用。在这种假设的基础上，本文研究了S02吸入对小鼠不 同组织器官的氧化损伤作用，提出了S02是一种全身性毒物的新观点。 1 材料与方法 1 1动物准备及组织匀浆液制备 将40只昆明纯系小鼠(18—209、5周龄)，雌、雄各半，随机分为对照组和SO。吸 入组，每组雌、雄各10只小鼠。sOz吸入组小鼠接受so,(84 mg／m3)染毒(在玻璃染毒箱 中进行)，每天4h，共7 d；对照组在同类大小的染毒箱中接受过滤的新鲜空气。染毒 箱内soz浓度采用盐酸副玫瑰苯胺分光光度法测定。 动物自由进食和饮水(自来水)，每周计算进食量并称量体重。s02染毒结束后禁 食24小时脱颈处死，立即取出脑、肺、心、肝、脾、肾等6个器官组织，在冰冷的生理 20min，取上清液立即进行各指标的测定。 1 2抗氧化酶活性与谷胱甘肽含量的测定 一700—— 超氧化物歧化酶(Cu、Zn—SOD)活性测定：采用改进的抗坏血酸(维生素C)终 止法，在420nm读光密度(OD)值”J。邻苯三酚自氧化率的OD值控制在006—0．07／rain。 谷胱甘肽过氧化物酶(GSH．Px)活性测定：采用DTNB直接法进行15J。以过氧化氢 (H202)为底物，5,5’二硫代．坝．2．硝基苯酸(DTNB)显色液(含004％DTNB，1％柠檬酸 min 二钠)，在5 9,J在422nm读光密度(OD)值。 底物，在25℃测240nmOD值的变化速率，以每分钟降解1nmol／L H202为1个活性单位。 谷胱甘肽(GSH)含量测定：总谷胱甘肽含量按照Jollow等的方法171进行。主要方 法为：取l mL mL组织匀浆上清液加入I 4％磺基水扬酸以沉淀残留蛋白，4℃r静置 min。样品测定混合物总体积为3mL，其中含01mL组织匀浆 1h，3000×g低温离心15 7 mL 上清液，2 mL磷酸缓冲液(0．1 7．4)及0．2 7一二硫代．双．2-硝基苯酸 mol／L，pH 5,5 (DTNB)显色液。室温下加DTNB显色液4rain，立即在4201110．测定OD值。各组织 中GSH含量nmol／mg蛋白质通过与标准曲线OD值比较而求得。 1．3脂质过氧化作用的测定 通过测定硫代