乌梢蛇及其混伪品的鉴别.docVIP

精品论文 参考文献 乌梢蛇及其混伪品的鉴别 （江苏省南京市江宁中医医院 江苏 南京 211100） 　　【摘要】 目的：分析乌梢蛇及其混伪品的鉴别方法，确保临床中药饮片质量。方法：对比分析乌梢蛇及其混伪品的鉴定方法，除了传统的性状鉴别，还有显微鉴别法、薄层层析法、紫外吸收光谱法、DNA图谱验证法、骨骼鉴别法等方面的差异。结论：乌梢蛇及其混伪品均有不同的性状和理化特征。注重乌梢蛇及其混伪品的特征差异，从性状、显微、理化特征等多方面综合鉴定，为饮片鉴别提供参考依据。 　　【关键词】 乌梢蛇；伪品；鉴别 　　【中图分类号】R281 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2016）34-0316-02 　　乌梢蛇为常用动物药材，分布于华东、华南、湖南、湖北、江西等地。其化学成分主要含有氨基酸类。善祛风通络，治风湿痹痛、麻木拘挛、中风口歪、半身不遂及麻风疥癣；定惊止痉，治小儿急慢惊风、破伤风。是一味常用的舒筋活络药，始载于宋《开宝本草》。2010年版药典收载的乌梢蛇为脊索动物门游蛇科动物乌梢蛇Zaocys dhumnade（Cantor.)除去内脏的干燥体。市场上人工养殖乌梢蛇没有形成较大的规模，药材供应以野生者为主，用药需求逐年增加，资源严重紧缺，因此从2010年之后价格节节攀升，一些不法分子为了牟取暴利，导致市场中常有伪品出现，给药材市场造成混乱，给临床用药带来危害。常见的乌梢蛇伪品主要是同科动物，如王锦蛇、黑眉锦蛇、红点锦蛇、玉斑锦蛇、赤链蛇、滑鼠蛇、灰鼠蛇、草游蛇、水赤链游蛇、中国水蛇等。因此，为了保证中医临床疗效，对乌梢蛇及伪品的鉴定有着重要的意义。目前，除了传统的性状鉴别，还有显微鉴别、薄层层析法、紫外吸收光谱法、DNA图谱验证法、骨骼鉴别等方法。下面笔者就乌梢蛇及常见伪品从几个鉴别方面加以比较，为科学应用乌梢蛇提供参考意义。 　　1.性状鉴别 　　正品乌梢蛇：形体较粗大，头颈区分不明显，全长可达2m以上。乌梢蛇呈圆盘状，盘径13～16cm。表面黑褐色或乌黑色，密背菱形细鳞片，背鳞行数成双为偶数，背中央2～4行鳞片强烈起菱，形成两条纵贯全体的黑线。头盘中间，扁圆形，似龟头，大多眼大不凹陷而有光泽；颊鳞1枚，眼前下鳞1枚，较小，眼后鳞2枚；口内有多数刺状牙齿。脊部高耸成屋脊状，俗称“剑脊”。腹部剖开边缘向内卷曲，脊肌肉厚，黄白色或淡棕色，可见排列整齐的肋骨。尾部渐细而长。剥皮者仅留头尾之皮，中段较光滑。气腥，味淡[1]。乌梢蛇混伪品较多，伪品与正品的主要鉴别点在于：蛇的头形非龟头状；蛇体背鳞行数为奇数；尾部粗短；“剑脊”不明显或没有。而各个伪品的蛇体表面颜色及鳞片数目又各有特征，如滑鼠蛇，颈部与蛇身为棕色，上唇鳞8片；灰鼠蛇，头颈部与蛇身为棕色，上唇鳞8片，颊鳞多为2片；赤链蛇，蛇体背部黑色，具多数红色横斑纹，上唇鳞8片，颊鳞1片入眶，头顶棕黑色，鳞缘红色，颅顶鳞有黑纹，左右斜向颈侧呈“人”字形。红点锦蛇，蛇身红棕色，尾下正中线为黑棕色，头背部具有不规则的倒“V”形黑斑纹，上唇鳞7片，颊鳞1片。王锦蛇，蛇体背部有黄色横纹，头背部鳞中央呈黄色，边缘具黑色斑纹，上唇鳞8片。 黑眉锦蛇，头侧眼后具黑眉线，蛇体背部灰棕色，具有黑色斑纹，上唇鳞9片，颊鳞1片。 　　2.显微鉴别 　　取蛇样品细粉，用甘油试液装片，在光学显微镜下观察组织形态，利用鳞片碎片的显微特征进行鉴别。乌梢蛇与伪品的粉末、表皮碎片、骨、肌纤维的特征相似，没有鉴别意义，而角质鳞片碎片特征各不相同，是粉末显微鉴别的重要特征[2]。从蛇的背部取下鳞片分别用水清洗，以稀甘油装片置光学生物显微镜下观察。乌梢蛇鳞片碎片表面具纵向弯细条纹，滑鼠蛇具同向交互排列条纹，以此可区别。利用端窝数的差异，脊棱有无，背鳞纹理、形状、大小进行鉴别。如乌梢蛇及其伪品滑鼠蛇、王锦蛇、水赤链游蛇、中国水蛇、红点锦蛇、玉斑锦蛇、草游蛇、灰鼠蛇的鉴别。乌梢蛇无脊棱，有端窝2个，背鳞菱形，两端略圆，表面有多数颗粒状物和纵条纹，几方面相结合，可与伪品区别。 　　3.薄层层析法 　　取蛇样品粗粉，制成脂溶性溶液，分别点于硅胶板上。以氯仿-丙酮(9.5:0.5)或甲苯-乙酸乙醋-冰醋酸为展开剂展开，用10%硫酸乙醇液或25%磷钼酸乙醇液喷雾后，烘15分钟。氯仿-丙酮(9.5:0.5)展开剂展开者置365nm紫外灯下观察，显较强荧光，甲苯-乙酸乙醋-冰醋酸展开剂展开者直接观察，可见清晰、分离效果好的一个斑点，并显强烈荧光。可利用该色谱斑点的差异进行鉴别。如乌梢蛇及其伪品滑鼠蛇、红点锦蛇、灰鼠蛇、王锦蛇、水赤链游蛇。结果乌梢蛇的薄层色谱显示出一个斑点(Rf=0.57)，特征明显，可作为乌梢蛇与其伪品的一个重要鉴别指标[3