光明液对视网膜光损害模型大鼠的疗效观察研究.pdfVIP

论文汇编 第六届中南地区实验葫斯科技主流套 光明液对视网膜光损害模型大鼠的疗效观察 ’ 王 萧”，胡世兴”，林少春2，郭学军3。邹移海3 100040 (1．中山大学中山眼科中心，广州510060；2．中国中医科学院眼科医院，北京 3．广州中医药大学实验动物中心，广州510405) 【摘要】目的探讨光明液对实验性视网膜光损害走鼠模型的治疗作用。方法SD 大鼠32只随机分为4组：光明液组、模型组、正常组和VitE组。采用手术显微镜光源(LUX 一 为30．000±50)照射SD大鼠右眼30min，建立急性光损伤模型。分别采用光明液、VitE滴 丸及等量蒸馏水进行灌胃治疗7d，观察细胞凋亡率、Caspase一3活力、NO含量变化及视 网膜外核层厚度改变。结果 光明液可以明显降低视网膜细胞的凋亡率，有效地抑制 细胞凋亡中的关键酶一Caspase一3蛋白酶的活力．还可一定程度减缓视网膜外核层厚 度的改变，对具有细胞毒性和氧化作用的NO也有较强的降低作用。与抗氧化荆VitE相 比，光明液的疗效要优于前者。结论 复方中药光明液是一种治疗视网膜光损害性痰 病的有效的中药复方制剂。 【关键词】视网膜；光损害；细胞凋亡；光明液；中药 视网膜是人体重要的光感受器官，特别容易受到各种可见光或人工光源的损伤，高强度的光 照射会导致视网膜的急性损伤。此概念早在柏拉图时代就已提出，但直到上世纪60年代，Noell“1才 开始实验研究。1966年Noellt”曾报道，一定量的光，即使低于热损伤的闽值，也可引起小鼠的视网 膜损伤。近年来，随着眼科光学诊疗器械和显微手术应用的增多，人们不仅对自然光，而且对各种 器械的光源所导致的视网膜损伤等问题进行了深入的研究。另外，重复的光照射。即使强度较低， 也可因光的蓄积作用而对视网膜产生损伤…，所以对视网膜光损伤的深入研究有着重要的临床和 理论价值。但目前对此类疾病的治疗尚无理想的措施。为积极寻找能有效改善视网膜光损伤程度 的、临床使用方便的、副作用较少的中成药注射液，我们利用显微手术的光源造成大鼠急性视网膜 光损伤摸型，来观察复方中药光明液对其的治疗作用，以期为对此类疾病的治疗寻找有效的防治 方法。 1材料和方法 1．1材料 · 16R删．，美[虱Hettieh 583 第六届中南地区实验动物科技交流套 论文汇编 (南京建成生物工程研究所)；流式细胞仪(美国Bekman Elite型)。光明液(党参159、 Couher．公司Epics 丸胶囊由广东中山市三才医药集团有限公司生产。光明液组及VitE组均按成人临床用量(光明液4．5∥ 期。到期后取材观察各项指标。 1．2方法 大鼠109／L戊巴比妥钠30mg／kgip结合乙醚间断性吸人全麻…，复方托晶酰胺充分散太右侧瞳 直照射大鼠瞳孔，照射时间为30rain。在光照过程中，确保角膜完全暴露，不断滴生理盐水湿润眼球 表面，工作温度保持在25℃左右。1)AnnexinV联合PI染色．视网膜组织剪碎后，加入PBS离一b5min，然 后加入2p．1 Annexin-V—fluorescein和100山Hepes buffer，上流式细胞仪(美国Bekman Elite型)检测。2)Cas— 入2山PI和100斗lHepes Coulter公司Epics 剪碎后，PBS清洗，置于冷的ceⅡLysis 380nm，发射波长为420—460nm。3)NO的检测．脱颈椎法处死动物，迅速摘除眼球，在冰环境下剥离 取上清液测NO含量按试剂盒操作说明，将NO