破壁方法对嗜热链球菌SP1_1胞内乳糖代谢关键酶活性的影响及其条件优化.pdf

※生物工程 食品科学 2011, Vol. 32, No. 09 183 破壁方法对嗜热链球菌SP1.1 胞内乳糖代谢 关键酶活性的影响及其条件优化 1 1, 1 2 2 1 1 李 琦 ，张兰威 * ，韩 雪 ，李沛军 ，马春丽 ，杜 明 ，易华西 (1.哈尔滨工业大学食品科学与工程学院，黑龙江哈尔滨 150090 ；2 .东北农业大学食品学院，黑龙江哈尔滨 150030) 摘 要：通过超声波破壁法、溶菌酶破壁法、反复冻融法和机械破壁法4 种不同破壁方式对嗜热链球菌SP 1.1进行 破壁处理，对菌体的破壁率、提取的β- 半乳糖苷酶和乳酸脱氢酶两种胞内酶的活力进行分析比较，以确定适合于 嗜热链球菌细胞破壁方法及其最佳条件。结果表明：这4 种菌体细胞破壁效果存在很大差异，其中经溶菌酶处理 胞内酶提取效果最好，破壁率可达99.87% ，β- 半乳糖苷酶酶活力为0.387U ，乳酸脱氢酶酶活力为2 .375U ，与其 9 他3 种方法的破壁效果差异极显著(P ＜0.0 1) 。优化溶菌酶破壁条件，当处理8mL 菌浓度为1.3 ×10 CFU/mL 的样 品时，确定处理最佳温度为37 ℃，时间为30min ，酶(20000U/mL)用量为1mL ，此时破壁率可达99.99% ，β- 半 乳糖苷酶酶活力为0.42 9U ，乳酸脱氢酶酶活力为2 .43 1U 。 关键词：破壁方法；嗜热链球菌；胞内酶 Effect of Different Cell Wall Disruption Methods on Key Enzyme Activities Involved in Intracellular Lactose Metabolism in Strep tococcus thermop hilus SP1.1 and Optimization of Lysozyme Digestion Conditions 1 1, 1 2 2 1 1 LI Qi ，ZHANG Lan -w ei * ，HAN Xue ，LI Pei-j un ，MA Chun-li ，DU Ming ，YI Hua-xi (1. School of Food Science and Engineering, Harbin Institute of Technology, Harbin 150090, China ； 2. College of Food Science, Northeast Agricultural University, Harbin 150030, China) Abstract ：Four different cell wall disruption methods, such as ultrasonic treatment, lysozyme digestion, repeated freezing and thawing and mechanical disruption were respectively used to treat Strep tococcus thermop hilus SP 1.1 cells, and the resultant cell wall disruption rates and the activities of the intracellular enzymes β-galactosidas