siRNA特异性抑制猪脑心肌炎病毒在BHK21细胞中的复制研究.pdfVIP

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2018-01-03 发布于广东
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siRNA特异性抑制猪脑心肌炎病毒在BHK21细胞中的复制研究.pdf

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siRNA特异性抑制猪脑心肌炎病毒在BHK一21细胞中的复制+ 贾红1，盖新娜1，郭鑫1，杨汉春¨，于康震2，陈振海1，陈艳红1，查振林1 (1、中国农业大学动物医学院农业部预防兽医学重点开放实验室，北京100094； 2、中国兽医药品监察所，北京100081) [摘要】为探讨siRNA在BHK一21细胞中对猪脑心肌炎病毒(EMCV)的作用，以EMCVBJC3分离株各基因为靶点，设计并合成了8对siRNA，通过脂质体法转染BHK一21细胞，转染后4小时感染500TCID∞EMCVBJC3，通过感染后不同时间段进行CPE观察、TCID50测定、real—time 该研究为探索EMCV感染的防治新途径奠定了基础。 [关键词]猪脑心肌炎病毒(EMCV)；RNAi；siRNA；BHK一21细胞 small RNAs-—mediatedinhibitionof of Specificinterfering replication virusinBHK——21 cells porcineencephalomyocarditis Jial，XinnaGel，XinGu01，Hanchun Chal Hong Yan91一，KangzhenYu2，Zhenhai Chenl，Zhenlin Chertl，Yanhong ofPreventive Medicineof of of (aKeyLaboratory Veterinary Medicine， MinistryAgriculture，CoHegeVeterinary China ChinaInstituteof AgriculturalUniversity，Beijing，P．R．China100094；b 100081) VeterinaryDrugcontrol，Beijing，P．R．China Abstractthis In small different re— study，eightspecificinterfereningRNA(siRNA)duplexestargeting genomie ofEMCVwere and BJC3 cellsweretransfectedwithsiRNA gions designedchemicallysynthesized．BHK一21 duplexes． andinfectedwith500 after4 ofEMCVBJC3 h abilitiestoinhibitvirus in TCID50 post—transfection．Their replication BHK一21cellswere CPE，virustitration，real—timePCR，indirectimmunofluoresceneandwest．