RP－HPLC法测定半夏天麻丸中盐酸小檗碱含量.docVIP

精品论文 参考文献 RP－HPLC法测定半夏天麻丸中盐酸小檗碱含量 杨善莉（连云港康济大药房连锁有限公司 222000） 【摘要】 目的：建立高效液相色谱法测定半夏天麻丸中盐酸小檗碱含量的方法。方法：色谱柱：ZORBAX Eclipse XDC-C18 柱（5micro;m,4.6times;150mm）；流速为1.0ml.min-1；柱温：30℃；流动相：乙腈-0.33mo/L磷酸二氢钾溶液（40：60）；检测波长：265nm；进样量：10micro;l。结果：盐酸小檗碱在浓度为5.22～83.54micro;g.ml-1时线性关系良好，r=0.9997，平均回收率为100.08％；RSD为1.6％（n=6）。结论：该方法简单、准确，可作为半夏天麻丸的质量控制指标之一。 【关键词】 高效液相色谱法 半夏天麻丸 盐酸小檗碱 【中图分类号】R927.2【文献标识码】B【文章编号】2095-1752（2013）08-0260-02 半夏天麻丸由法半夏、天麻、炙黄芪、陈皮、黄柏、人参、茯苓、六神曲（麸炒）等十二味药组成，具有健脾祛湿、化痰熄风的功能，用于脾虚聚湿生痰，眩晕，头痛，如蒙如裹，胸脘满闷。该制剂现行执行《中国药典》2010年版中收载的标准，该标准对制剂中含有的盐酸小檗碱仅有薄层色谱鉴别方法，并未对其进行定量控制，为控制其产品质量，完善质量标准，本文采用反相高效液相色谱法对制剂中的该成分进行定量分析。 1 仪器与试药 Agilent 1260高效液相色谱仪；盐酸小檗碱对照品（中国药品生物制品检定所提供，批号110713-200911，含量以86.8%计）；半夏天麻丸（太极集团四川绵阳制药有限公司，批号55100014规格：每100丸重6g），甲醇为色谱纯，其它试剂均为分析纯。 2 方法与结果 2.1 色谱条件 色谱柱：ZORBAX Eclipse XDC-C18柱（5micro;m,4.6times;150mm）；流速为1.0ml.min-1；柱温：30℃；流动相：甲醇－0.033mol/L磷酸二氢钾溶液（40：60）；检测波长：265nm；进样量：10micro;l。 2.2 对照品溶液制备 精密称取盐酸小檗碱对照品12.03mg，置100ml容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，制成104.42micro;g/ml的贮备液。分别精密量取0.5ml、1.0ml、2.0ml、4.0ml、8.0ml，各置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，分别制成5.22、10.44、20.88、41.77、83.54micro;g.ml-1的溶液，即得。 2.3 供试品溶液制备 称取半夏天麻丸粉末（过六号筛）约1g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入盐酸-甲醇（1:100）溶液20ml，密塞，称定重量，超声处理（功率400W，频率80KHz）45分钟，通过0.45micro;m的微孔滤膜，取续滤液作为供试品溶液。 2.4 线性范围 分别精密量取“2.2”项下的盐酸小檗碱对照品溶液各10micro;l注入高效液相色谱仪进行测定，测量峰面积。以对照品浓度（micro;g）为横坐标，峰面积为纵坐标，经线性回归。结果表明：盐酸小檗碱在5.22～83.54micro;g.ml-1范围内与峰面积线性关系良好。其回归方程为：Y=49.59X-21.04，r=0.9997。 2.5 干扰试验 将除黄柏的其他几味药材按处方所述方法制成阴性供试品，照“2.3”项下操作，制成阴性供试品液。在相同色谱条件下进样。色谱图见图1。 A B C A.对照品 B. 供试品 C.不含黄柏的阴性对照 图1 半夏天麻丸的色谱图 2.6 精密度试验 精密量取上述对照品溶液（20.88micro;g.ml-1）10micro;l ，连续进样6次，记录峰面积，结果峰面积RSD=0.6%（n=6）。 2.7 稳定性试验 精密吸取同一样品溶液10micro;l，分别在0、3、6、9、12、18、24 h进样，结果24h内峰面积RSD=1.3%(n=7)。结果表明，样品液待测组分在24h内稳定。 2.8 重复性试验 取同一批号样品6份，测定含量，结果表明，本方法重复性良好，盐酸小檗碱含量RSD=1.2％（n=6）。 2.9 加样回收率试验 取同批号样品6份，每份1g，分别加入盐酸小檗碱对照品适量，按2.3项