2012届高考生物选修3第一轮知识点复习5.pptVIP

* * * ①限制酶不切割自身DNA的原因是：原核生物中不存在该酶的识 别序列或识别序列已经被修饰。 ②DNA连接酶起作用时不需要模板。 2.载体 (1)具备条件： ①对受体细胞无害，不影响受体细胞正常的生命活动。 ②具标记基因。能对重组DNA是否进入受体细胞进行检测。 ③能自我复制。通过复制进行基因扩增，否则可能会使重组DNA 丢失。 ④具有一个或多个限制酶切点，供外源基因插入其中。 (2)常用载体——质粒：裸露的、结构简单且独立于细菌拟核DNA之外 的，具有自我复制能力的小型环状DNA分子。 1．如图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种 酶的作用部位，则相应的酶依次是 (　　) A．DNA连接酶、限制酶、解旋酶 B．限制酶、解旋酶、DNA连接酶 C．解旋酶、限制酶、DNA连接酶 D．限制酶、DNA连接酶、解旋酶 解析：使碱基对内氢键断裂的是解旋酶；限制酶将特定部位的相邻的两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键断开；连接DNA片段间磷酸二酯键的是DNA连接酶。 答案：C 2．除了下列哪一项之外，其余的都是基因工程的运载体所 必须具备的条件 (　　) A．能在宿主细胞中复制并保存 B．具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 C．具有标记基因，便于进行筛选 D．是环形状态的DNA分子 解析：可以作为基因工程运载体的有质粒、λ噬菌体的衍生物。动植物病毒等，其中很多病毒的DNA分子不是环状的，所以DNA分子是环状的不是作为运载体必须具备的条件。 答案：D 考点二 基因工程的基本操作程序 命 题 解 读 　 基因工程的基本操作程序是近几年高考的高频考点，分值比重较大，一般和其他工程结合考查，考查形式既有简答题又有选择题。预计2012年高考通过与其他工程技术综合考查学生解决实际问题的能力。 [示例2]　(2010·天津高考)下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamH Ⅰ、Hind Ⅲ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。 据图回答： (1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含________的培养基上进行。 (2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是________(填字母代号)。 A．启动子　　　　　　　　 B．tetR C．复制原点 D．ampR (3)过程①可采用的操作方法是________(填字母代号)。 A．农杆菌转化 B．大肠杆菌转化 C．显微注射 D．细胞融合 (4)过程②采用的生物技术是________。 (5)对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的________性。 (6)为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用________(填字母代号)技术。 A．核酸分子杂交 B．基因序列分析 C．抗原—抗体杂交 D．PCR [解析]　本题综合考查基因工程和胚胎工程的相关知识，同时考查利用所学原理解决实际问题的能力。(1)Sam Ⅰ酶切位点在人乳铁蛋白基因内，如用其酶切，则会破坏目的基因，故排除。为防止目的基因和载体自身连接，在利用限 制酶进行切割时，两端需要剪切成不同的黏性末端，因此 需要用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时酶切载体和人乳 铁蛋白基因。因人乳铁蛋白基因插入位置位于tetR四环素抗性基因内，因此该基因不能表达而导致受体细胞无四环素 抗性；又因为载体上的ampR氨苄青霉素抗性基因未被破坏，所以受体细胞具有氨苄青霉素抗性，故筛选含有重组 载体的大肠杆菌需要在含氨苄青霉素的培养基上进行。(2)启动子位于基因的首端，可驱动基因转录出信使RNA，使基因得以表达，故属于调控序列。(3)①过程将目的基因导入到动物的受精卵中，一般采用显微注射法。(4)②过程表示将