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分子植物育种，2015年，第 13卷，第 1期，第 190—196页 MolecularPlantBreeding，2015，Vo1．13，No．1，190—196 技术主题 TechnologyFeature 不同分离缓冲液对杉木根尖细胞核悬液DNA分辨率的影响 沈捷 徐进 刘光欣 施季森 ’ 林木遗传和生物技术省部共建教育部重点实验室，南京林业大学，南京，210037 通讯作者，jshi@njfu．edu．cn 摘 要 为制备高纯度的杉木细胞核悬液供BDInfluxMT流式细胞分选仪使用，本研究配制了6种细胞核分离 缓冲液制备样品，就不同分离缓冲液对DNA分辨效果进行比较。研究结果显示，WPBbuffer不能获得有效分 辨的峰形，而OTTO’Sbuffer表现为最高的分辨率，G0／G1峰的变异系数为4．61％。其余4种细胞核分离缓冲液 (Arumuganathan’Sbuffer。Galbraith’Sbuffer,LysisbufferLB01和Marie’Snuclearisolationbuffer)的变异系数在 5％～8％之间(分别为5．49％，7．30％，5．12％和6．89％)。本研究分别选用了DAPI和PI对细胞核悬液进行染色发 现，利用DAPI染料获得的柱状图CV值更小、分辨率更高。研究结果表明，利用LysisbufferLB0