第5章 灭菌及空气除菌.ppt

第五章 发酵工业的灭菌及空气除菌 第一节 消毒与灭菌 第二节 发酵工业的无菌技术 第三节 培养基与发酵设备的灭菌 第四节 空气的除菌 目的要求：　 了解灭菌对发酵工业的意义，灭菌的原理及常用的方法。 掌握培养基及发酵设备的灭菌方法。 了解生产中空气除菌的基本方法、原理及设备。理解空气净化流程。 几个问题 1、灭菌对发酵的意义 2、灭菌的原理 3、灭菌的方法 4、灭菌的对象 5、空气的灭菌 灭菌的目的及内容 目的：为了保证纯种并安全发酵 内容： 培养基 补料液（流加料） 发酵过程的无菌控制 空气系统 直接关系到 发酵罐 生产的成败! 管道系统 环境：需要消毒 第一节 消毒与灭菌 一、控制有害微生物的主要措施 二、几个概念 （一）灭菌 （二）消毒 （三）防腐 （四）化疗 （一）灭菌（sterilization） 灭菌： （p128） 采用理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施，称为灭菌。 Sterilization就是失去繁殖力。 例如各种高温灭菌措施等。 灭菌实质上可分杀菌和溶菌两种，前者指菌体虽死，但形体尚存，后者则指菌体杀死后，其细胞发生溶化、消失的现象 。 （二）消毒 从字义上来看，消毒就是消除毒害，这里的“毒害”就是指传染源或致病菌的意思。 消毒:是一种采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的病原菌，而对被消毒的物体基本无害的措施。 （三）防腐（antisepsis） 防腐:就是利用某种理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖，从而达到防止食品等发生霉腐的措施。 （1）低温 （2）缺氧 （3）干燥 （4）高渗 （5）高酸度 （6）防腐剂 （四）化疗（chemotherapy） 化疗:即化学治疗。它是利用具有高度选择毒力（即对病原菌具有高度毒力而对宿主无显著毒性）的化学物质来抑制宿主体内病原微生物的生长繁殖，借以达到治疗该传染病的一种措施。 用于化疗目的的化学物质称化学治疗剂。最重要的化学治疗剂如各种抗生素、磺胺类药物和中草药中的有效成分等。 第二节 发酵工业的无菌技术 常用的除菌方法（p128-129） 一、高温灭菌：干热灭菌和湿热灭菌。火焰灭菌：接种时用。 二、射线灭菌：用紫外线、高能电磁波或放射性物质产生的高能粒子进行灭菌的方法。 三、化学药剂灭菌：一些化学药剂能与微生物反应而具杀菌作用。适用于环境、设备等方面的消毒，一般不用于培养基的灭菌。 四、过滤除菌：利用过滤方法阻留微生物，达灭菌目的。适用于澄清流体（如气体和液体）的除菌以及热敏性培养基的除菌。 一、高温杀菌 （一）高温致死原理 （二）高温灭菌的方法 （三）高温对培养基成分的有害影响及其防止 （四）灭菌设备 （一）高温致死原理 高温使微生物的蛋白质和核酸等重要生物高分子发生变性、破坏。 例如它可使核酸发生脱氨、脱嘌呤或降解，以及破坏细胞膜上的类脂质成分等。 1．干热灭菌法 干热灭菌法： 将金属制品或清洁玻璃器皿放入电热干燥箱内，在160～170℃下维持1～2h后，即可达到彻底灭菌的目的。 原因：在这种条件下，可使细胞膜破坏、蛋白质变性、原生质干燥，以及各种细胞成分发生氧化。 适用对象：玻璃器皿、金属材料、耐高温物品。 灼烧：是一种最彻底的干热灭菌方法，但它只能用于接种环、接种针等少数对象的灭菌。 2．湿热灭菌法 湿热灭菌法：利用饱和蒸汽进行灭菌的方法。 湿热灭菌法与干热灭菌法的比较：湿热灭菌法比干热灭菌法更有效，这一方面是由于湿热易于传递热量，另一方面是由于湿热更易破坏保持蛋白质稳定性的氢键等结构，从而加速其变性。 方法：常压和高压。 微生物的耐热情况： 多数细菌和真菌的营养细胞在60℃左右处理5～10min后即可杀死； 酵母菌和真菌的孢子稍耐热些，要用80℃以上的温度处理才能杀死； 细菌的芽孢最耐热，一般要在121℃下处理15min才能杀死。 （1）常压法 巴氏消毒法： 用于牛奶、啤酒、果酒和酱油等不能进行高温灭菌的液体的一种消毒方法，其主要目的是杀死其中无芽孢的病原菌（如牛奶中的结核杆菌或沙门氏菌），而又不影响它们的风味。它是一种低温消毒法。 低温维持法：在63℃下保持30min可进行牛奶消毒； 高温瞬时法：用于牛奶消毒时只要在72℃下保持15秒钟即可。 间歇灭菌法：又称丁达尔灭菌法或分段灭菌法。 方法：将待灭菌的培养基在80～100℃下蒸煮15～60min，以杀死其中所有微生物的营养细胞，然后置室温或37℃下保温过夜，诱导残留的芽孢发芽，第二天再以同法蒸煮和保温过夜，如此连续重复3天，即可在较低温度下达到彻底灭菌的效果。 用途：适用于不耐热培