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1例HIV窗口期样本的检测研究 陆荣 王凯 王玲玲 金一鸣 汤龙海 潘志荣 苏州市中心血站 X 关注成功！ 加关注后您将方便地在 我的关注中得到本文献的被引频次变化的通知！ 新浪微博 腾讯微博 人人网 开心网 豆瓣网 网易微博 关键词： 艾滋病; 窗口期; 核酸检测; 作者简介：潘志荣, E-mail:pzriso@126.com。 收稿日期：2017-05-19 Received： 2017-05-19 艾滋病是由免疫缺陷病毒 (HIV) 引起的以免疫功能障碍为特征的传染性疾病[1], 输血是其传播的重要途径之一。目前血站主要采用酶联免疫吸附法 (ELISA) 检测HIV抗体, 输血安全得到极大提高。但由于检测方法局限性及病毒窗口期的存在, HIV经输血传播风险依然存在[2-3]。近年来核酸检测 (NAT) 技术作为一种新型的检测方法, 先后被欧美、日本以及中国香港等近20个国家和地区用来做献血者血液筛查[4-5]。有研究表明, NAT检测可将ELISA检测“窗口期”缩短11d (50%) [6-7], 大大降低病毒经输血传播的风险。本站通过NAT检测, 发现1例ELISA阴性NAT阳性的献血者, 结果报告如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料 在征得该ELISA阴性NAT阳性献血者知情同意后, 每周定期采集其血液样本, 所有样本酶免管3 000r/min离心15min, 核酸管4h内4 000r/min离心20min, 均于2~8℃储存。 1.2 仪器与试剂 抗HIV初检试剂 (人类HIV抗原抗体诊断试剂盒, 北京万泰) , 抗HIV复检试剂 (人类HIV抗体诊断试剂盒, 英科新创) , 罗氏cobas TaqScreen MPX Test v2.0核酸定性检测试剂盒, Cobas Ampliprep/Cobas Taqman HIV-1Test, v2.0核酸定量检测试剂盒, 全自动加样仪 (RSP/EVO) , 全自动酶免仪 (FAME24/20) , 全自动加样仪 (Micro STAR) , 核酸提取扩增分析系统 (Cobas S201) 。 1.3 检测方法 1.3.1 检测流程 所有样本经2遍酶免检测后, 再进行NAT定性定量检测。 1.3.2 酶免检测 样本严格按照本实验室SOP操作, S/CO≥1判为反应性, S/CO1判为阴性。 1.3.3 核酸定性检测 样本首次NAT检测阳性后, 其追踪检测标本只进行单样本NAT检测, 单标本检测阳性判定为NAT反应性, 单标本检测阴性判定为NAT阴性。 1.3.4 核酸定量检测 取不同时期样本1 mL, 采用Cobas S201系统进行定量检测。 2 结果 2.1 献血者首次酶免结果为双阴性, 但核酸检测混样结果为有反应性 (CT值为37.8) , 经拆分检测其结果仍为有反应性 (CT值为38.7) 。定量结果为20IU/mL, 属于低浓度样本, 见表1。 2.2 追踪随访 2.2.1 献血者信息 男, 25岁, 籍贯山东, 汉族, 有2次献血经历, 第一次体检初筛不合格, 2个月后献血成功。 2.2.2 对献血者随访检测结果 对献血者进行跟踪随访, 得知献血者近期曾有不洁暴露史。随访检测结果共2次, 初次检测1周后采血, 酶免检测2遍都为阴性, 核酸检测为有反应性, CT值为20.7, 且病毒浓度上升至6.06×10IU/mL;2周后采血, 万泰试剂检测出有反应性, S/CO值为3.26, 新创试剂检测为阴性, 核酸检测有反应性, CT值为14.7, 浓度急剧上升至2.95×10IU/mL;3周后献血者失联, 见表1。 表1 初次及随访样本检测结果 ?? 下载原表 3 讨论 近年来, 我国HIV感染人数逐步增加, HIV也从高危人群向普通人群蔓延[8], 无偿献血感染者数量也逐渐上升。通过对所献血液进行HIV抗原或抗体的检测, 其经输血传播的风险大大降低了, 但病毒检测窗口期问题一直存在, 也受到国内外学者的重视。随着NAT技术成熟应用于病毒检测, HIV检测窗口期大大缩短。我国于2010年开展核酸检测试点, HIV病毒检测窗口期的缩短也陆续被报道[9-10]。 本站2015-2016年仅发现1例HIV抗体检测阴性、核酸检测HIV为反应性献血者。此献血者初次酶免检测结果均为阴性, 核酸检测混检、单检均指向HIV有反应性, HIV定量检测结果浓度20IU/mL, 属于低浓度感染。为避免核酸检测出现差错, 笔者进一步对此献血者的献血袋血液进行检测, 核酸结果仍为HIV反应性, CT值为38.8。随后对献血者跟踪监测:1周后采集标本, 核酸定性检测CT值下降至20.7, 浓度急剧上升至6.06×10IU/mL, 但酶免检测结果仍为阴性。2周后