第四章 微生物与新能源新材料的开发.pptVIP

四、发酵工艺的选择 使用酶水解法生物转化纤维类生物质的过程通常涉及4步生物催化反应：纤维素酶生产、纤维素水解、己糖发酵和戊糖发酵。根据这些生物反应被组合的程度，工艺过程变化很大。 水解发酵二段法： 用纤维素发酵酒精，如将纤维素先用纤维S素酶糖化再经酵母发酵成酒精的方法，即所谓水解发酵二段法(separate hydrolysis and fermentation，SHF). 水解发酵二段法的致命弱点是由于生成的葡萄糖可抑制纤维素酶的作用。对于这一点，产生的葡萄糖可用透析法除去。 同步糖化发酵 水解发酵二段法的致命弱点是由于生成的葡萄糖可抑制纤维素酶的作用。随着水解过程中葡萄糖浓度的不断升高，酶解反应很快就因为产物抑制作用而终让了，因此葡萄糖的转化率低。 若在加入纤维素酶的同时接种酒精发酵的酵母，可使生成的葡萄糖立即被酵母发酵成酒精，去除了产物抑制，就可以不妨碍纤维素糖化的继续进行，酒精收得量可为二段法的4倍，这就是所谓的同步糖化发酵(Simultaneous saccharification and fermentation，SSF). 同步糖化共发酵 随着能同时发酵戊糖和己糖的稳定的基因重组菌株的获得，“同步糖化共发酸(Simultaneous saccharification and cofermentation，SSCF)技术也发展起来。 在中试条件下，经过稀酸预处理的玉米纤维在总固体物浓度为20%、纤维素酶用量为每克纤维素使用滤纸酶活(FPA)为10U、30℃、150r/mm、pH5.0条件下，使用普度大学构建的重组酵目LNH-ST菌株进行同步糖化共发酵4d，78.4%的可用葡萄糖和56.1%的可用木糖被转化成乙醇。 统合生物工艺 自然界中的某些微生物(如Clostridium、Moniliar、Fusarium、Neurospora等)都具有直接把生物质转化为乙醇的能力。这就为在同一个生物反应器中利用同一种微生物，完成生物质转化为酒精所需的酶制备、酶水解及多种糖类的酒精发酵等全过程，从而简化工艺，降低成本提供了可能。 统合生物工艺(consolidated bioprogressing，CBP)，先前被称为直接微生物转化(direct microbial conversion DMC)，将纤维素酶生产、水解和发酵组合在一步里完成。 一些兼性好氧的微生物，如尖孢镰刀菌、粗糙脉孢菌，它是纤维素酶高产菌株，也能发酵葡萄糖、木糖和纤维二糖，也能直接转化纤维素成酒精。首先，通过供氧预培养生成菌体和纤维素酶，然后，停比供氧，转入发酵阶段，即可生产酒精。 CBP需要的菌株也可以通过代谢途径工程方法构建。像木糖发酵菌株构建一样，CBP代谢工程也可以通过两条途径进行：天然底物利用策略和重组菌底物利用策略。 §3.沼气发酵及其综合利用一、沼气发酵的基本原理 人们很早就发现，富含有机物的沼泽地会发酵形成很多可燃性的混合气体，这种混合气体被称为沼气。 沼气是无色的，通常含有约60%-70%甲院、30%-40%二氧化碳，及少量氢、氮和硫化氢等其它气体。 沼气具有很高的热值，1m3沼气的热值达20000kJ以上。完全燃烧时，可放出23012-27196kJ热量，是很好的气态燃料。 各种废弃的有机物，如农作物秸秆、人畜粪便、工业废液废渣、城市垃圾等，都可以用来发酵生产沼气，为人类提供了消除环境污染、生产可再生能源的重要途径，具有很大的发展潜力。 微生物降解有机物发酵形成甲烷的过程可以分成两个或三个阶段。 聚合物降解阶段： 大分子高聚物 可溶性小分子 梭菌属 拟杆菌属 葡萄球菌属 芽孢杆菌属 产酸阶段： 小分子糖类 挥发性有机酸 （乙酸、乳酸、丙酸） 链球菌属 乳杆菌属 梭菌属 pH 乙酸、氢和二氧化碳 产氢产乙酸细菌 互营杆菌属 互营单胞菌属 5.0-6.0 甲烷形成阶段： 有机酸(主要是乙酸) 甲烷和二氧化碳 pH 7.2-7.4 甲烷杆菌属 甲烷八叠球菌属 甲烷球菌属 （ 2 ）辅酶 M （ CoM ，CoM-SH ） CoM 是所有已知辅酶中最小的具有渗透性、含量最高、对酸和热稳定的辅助因子。在 260nm 处呈现最大吸收峰。CoM 在产甲烷细菌细胞内的含量很高，平均浓度可达 0.2~2mmol/L 。是一种甲基转移酶的辅酶，即为活性甲基的载体。 另外还有参与 C1 的还原反应的甲基蝶呤（ Methanopterin ，MPT ），其结构与叶酸相似，作用功能也与其相同。 在产甲烷和产乙酸过程中起甲基载体作用的 CO2还原因子（Carbon dioxide reducing factor ，CDR ）也即甲烷呋喃（ Methanofuran ，MFR ）。 另一个 F430 ，是存在于嗜热自养甲烷杆菌中含 Ni 的四吡咯结构，是甲基