贵州奶牛乙型肝炎的调查和病理形态学观察研究.pdf

328 中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2006年学术研讨会论文集 贵州奶牛乙型肝炎的调查和病理形态学观察 谭诗文冉懋韬艾玉萍王凡金志强扬粤勇 (贵州省畜牧兽医科学研究所贵阳550005) 摘要：在检测610份奶牛血清中，有116份血清为HBsAg(表面抗原)阳性，平均阳性率18．名；290头 阳性，阳性率为5≈，165头份HBcAb阳性，阳性率为27％。将HbsAg、HbeAg阳性奶牛肝组织儆电镜观察，发现 肝组织中有密集的HBV颗粒，包括大球彤Dane颗粒、小球形颗粒、管球形颗粒三种。这些颗粒与人HBV的颗 粒相似。奶牛乙型肝炎组织病理学观察，主要表现为肝细胞的变性，肝细胞坏死，炎症细胞浸润， 肝实质 细胞再生和阃质组织反应增生。奶牛乙型肝炎超微结构的观察主要表现为肝细胞的胞浆内线粒体变性、坏 死、溶解、消失。核膜的双层膜不清或破裂，桉孔增大。 关键词：乙型肝炎，血清学，奶牛墒理学 亿，每年死于HB及相关性疾病者在案16万人以上。HB已成为我国危害最大的社会公共卫生问题。但近 年来兽医学界有关畜禽感染HBV的报道日益增多，国内很多学者在牛、羊、猪和家禽等多种动物血清 奶牛血清中观察到类似HBsAg颗粒和Dane病毒样颗粒。在畜禽血清中检出携带有类似乙型肝炎病毒抗 原(HBsAg)，这在公共卫生学上及流行病学上引起人们极大关注。 1材料和方法 1．1材料 盒。 1．1．2奶牛血清来源于全省4个地区的奶牛场及奶牛饲养户，经颈静脉采血分离。共收集610头奶牛血 清。 1．2方法 HBeAb、HBcAb。用双抗体夹心法检河UHBsAg．HBeAg。操作步骤如下： 将特异性抗体与固相载体联结，形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。加受检标本，保 温反应。标本中的抗原与固相抗体结合，形成固相抗原抗体复合物。 洗涤除去其他未结合物质。加酶标抗体，保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底 洗涤未结合物质。加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色，测知标本中抗原的量 1．2．2用竞争法测抗体HBsAb、HbeAb、HBcAb。 其原理为标本中的抗体和一定量的酶标抗体竞争与同相抗原结合。即先包被与固相抗原相应的抗 体，然后加人抗原，形成固相抗原。洗涤除去抗原中的杂质，然后再加标本和酶标抗体进行竞争结合 抗原一起加入到同相抗体中进行竞争结合，洗涤后再加入酶标抗体，与结合在固相上的抗原反应。 1．2．3用肝脏穿刺法。采取20头奶牛肝脏组织活体样本。用长12，15厘米，内径3毫米的长注射针头 基金项目：本项目为贵州省科学基金项目(黔科蕞字2003(10)) 作者简介： 谭诗丈，1957，男，苗。 贵州灭柱，研究员， 大学．研究方向为兽医微生物学和兽医病理学。 中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2006年学术研讨会论文集 329 Gieson氏、过 在1l～12肋间进行穿刺，将肝组织保存于10％福尔马林中做病理切片观察，用HE、van 碘酸．苹肼．Schiff(PAS)希夫氏染色法分别对比较完整肝组织进行切片和染色。另将一部分肝脏组织活体 样本放在灭菌的平皿中，剪碎研磨，用灭菌生理盐水稀释后，吸取上清液1．5ml，置Eppendorf管中， 染，电镜观察病毒颗粒。 2结果 2．1血清学检测： ． HBeAg阳性，阳性率为2％，165头份HBcAb阳性，阳性率为27％。详细见表1、2。 童! 量塑塑主旦里!垒9旦旦!些!旦旦!垒g!旦旦!垒!!蔓旦!些鳖型堕墨皇堕!塾!塾 些匡鱼整墼堕兰墼 旦!!垒g 坚!!垒! 旦堡垒g一一．．坚坚竺 旦竺垒! 坚!!垒!堡!生 阡1性阳性率阳性阳性率阳性阳性率阳性附性率阳性阳性率阳性阳性率 坚!!皇g 坠!垒!坚堕垒g 旦塑垒! 望!!垒! 盟 O 10 10 有50头份。HBsAb有240头份。HBcAb有12头份。 2．2肝功能检测： (CHB)。