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白血病患者血液的紫外光谱研究

精品论文 参考文献 白血病患者血液的紫外光谱研究 赵倩倩(郑州大学体育学院 河南 郑州 450044) 中图分类号:R733.7 文献标识码:A 文章编号:41-1413(2012)03-0000-01 提要:本文用分光光度计采集正常人及白血病患者血液吸收谱,分析200-800nm范围内的光谱,发现两者的紫外光谱的峰峰比I275/I541和I541/I576的比值有差别。同时,由于血液蛋白质各组分的含量与血浆不同,血液275nm附近的吸收峰较血浆279nm附近的吸收峰出现蓝移。 关键词:白血病;血液;紫外-可见吸收光谱 血液是人体特殊而重要的一种组织,含有各种营养成分,如无机盐、氧、代谢产物、激素、酶和抗体等,人体各器官的生理和病理变化,往往会引起血液成分的改变。因此临床上常常将化验血的结果作为诊断很多疾病的重要依据,光谱技术在这方面具有良好的应用前景[1-3]。 白血病是一种造血系统的恶性疾病,其主要特征为异常的白细胞及其幼稚细胞(即白血病细胞)在骨髓及其他造血组织中进行性、失控制的异常增殖,最终浸润、破坏全身任何器官组织,造成正常造血和免疫功能受抑,使正常血细胞生成减少,导致贫血、出血、感染和浸润等征象,并伴有周围血中白细胞质和量的改变,是一种异质性疾病[4,5]。 一、实验部分 样品:健康人样品13例,由郑州市骨科医院提供; 白血病患者样品17例,由郑州大学第一附属医院检验科提供 试验仪器:日本岛津公司的UV-3150型分光光度计,石英池。 参数设定:测试范围200-800nm,采样间隔0.5nm,狭缝宽度5.0nm,中速自动扫描,检测器为光电倍增管。 实验方法:在参照池与样品池(均为石英池)中分别加入3ml双蒸水作基线校准,之后参照池不动,从样品池中取出0.01ml双蒸水,再加入0.01ml健康人或白血病患者的血浆样品混匀后测紫外光谱 二、实验结果与分析 测得光谱如图1所示: 图1 血液的吸收光谱 a为健康人血液紫外光谱;b为白血病血液紫外光谱;c为抗凝剂肝素钠紫外光谱 两种血液的紫外光谱在276nm、344nm、414nm、541nm、576nm附近出现吸收峰 ,254nm、307nm、369nm、559.5nm附近出现吸收谷,414nm附近的吸收峰强度最大。而根据我们之前的研究血浆的紫外光谱只在279nm出现吸收峰在254nm附近出现吸收谷[6],较血浆279nm附近的吸收峰血液的吸收峰出现在276nm附近,有位移。有资料表明414nm附近的吸收峰是红细胞的贡献[7],葛向红等也作实验证明了这一点[8]。由于我们实验采用的是双蒸水,而红细胞遇水后会发生溶血而破裂释放出血红蛋白,血红蛋白(Hb)与O2结合生成氧合血红蛋白(HbO2)。有资料表明氧合血红蛋白的在可见区的吸收峰在540nm、576nm附近[9]; 275nm附近的吸收峰是血液中白蛋白的贡献 [10,11],因此,我们认为实验中血液紫外光谱414nm、541nm、576nm附近的吸收峰是红细胞的贡献,275nm附近的吸收峰来自白蛋白。我们已知血浆紫外谱279nm的吸收峰是血浆蛋白质的贡献,来自蛋白质中的吸收峰在272nm附近的酪氨酸、吸收峰在282nm附近的色氨酸和吸收峰在254nm附近的苯丙氨酸[12],血液紫外谱275nm附近的吸收峰较血浆紫外谱279nm附近的吸收峰有蓝移,这是血液蛋白质各组分的含量较血浆不同引起的,我们推测可能是血液中酪氨酸含量较血浆多的缘故,具体原因有待于进一步分析。 抗凝剂肝素钠在大于250nm的区域几乎没有吸收,在200-250nm区域,其吸收率也远低于人血液的吸收率,因此,它基本不影响这一波段血液的吸收特性。 三、血液紫外光谱分析 数据处理:采用美国Microcal公司的Origin数据分析和绘图软件 图2 I275/I541的散点图 图2 I541/I576的散点图 对30例血浆光谱作白蛋白和氧合血红蛋白相对峰峰比I275/I541和氧合血红蛋白的两个吸收峰的峰峰比I541/I576的散点图(如图2-3所示)。 散点图2-3的分析: I275/I541: 健康人血液 I275/I541gt;3.25 12例 符合率92.3% 白血

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