单细胞成像观测研究简介.docVIP

单细胞成像观测研究简介* 袁倬斌 （中国科学院研究生院化学与化学工程学院， 中国科学院研究生院应用化学研究所，北京100049） （一）前言 单细胞成像（图像）分析已采用荧光显微镜、共聚焦荧光显微镜、多光子荧光显微镜、全内射荧光显微镜、荧光寿命图像显微镜、近场扫描光学显微镜、荧光相关光谱显微镜、生物发光及化学发光显微镜、激光热透显微镜、质谱（动态二级离子质谱、TOS-SIMS、MALDI-MS）、电子显微镜（扫描电镜及透射电镜）、共聚焦拉曼显微镜、同步加速器X-射线显微镜、扫描电化学显微镜、原子力显微镜、扫描坠道显微镜等。在此，主要介绍单细胞的原子力显微镜成像（图像）观测研究，其它方法则只作简介。 1.1 单细胞分析的目的和任务 （1）细胞：细胞（cell）是生物体的形态结构和生命活动的基本单位，是独立生存的生命实体，是展现活的生命状态全部特点的最小单位，是组成（构成）所有生命物质的基本单元。细胞是生命的缩影，它不仅体现了生命的多样性和统一性，更体现了生命的复杂性。它是以膜为界的一个小室，充满着生物分子，其浓度和组成的变化都决定着细胞的生存、繁殖、损伤和死亡。细胞的新陈代谢、呼吸作用、光合作用都与细胞的整体状况有关。大多数的生物化学反应也都是在细胞中进行的。恩格斯早就指出：人们在整个有机界里所看到的最简单的类型是细胞；它确实是最高级的组织基础。为此，要了解生物体的生命活动的规律，就必须从它的基础，细胞研究入手。细胞学（cytology）就是研究细胞的结构、功能和生活史的科学。研究的对像就是细胞。 （2）干细胞：干细胞（stem cells）是一类具有自我更新和分化潜能的特殊细胞。目前人类胚胎干细胞（embryonic stem cells）已可成功地在体外培养，变成所需要的功能细胞，以替换坏死的细胞，从而修复病变的组织以治疗疾病。 这种被誉为“源泉细胞”或“万能细胞”的干细胞可以分为三类：全能干细胞、多能干细胞和专能干细胞。 _______________________ * 本工作承：国家自然科学基金；国家自然科学基金分析化学重点基金；电分析化学国家重点实验室基金；国家中药“95攀登计划”（国中医科（1998）19号）（中医研究院中药研究所，中国科学院研究生院应用化学研究所，中国同仁堂集团公司）；国家科技部“95”国家重点科技攻关项目（96-A23-06）及“十五”国家重大科技攻关项目（2001BA210A04-7）和中国科学院的资助，特在此致谢。 全能干细胞可以分化成人体的各种细胞。人类的精子与卵子最初结合形成受精卵，这个受精卵就是一个最初始的全能干细胞，之后，一个分裂成两个完全相同的细胞，两个分裂成四个，八个。八个中的任何一个细胞单独放入女性子宫中均可发育成个体。这些细胞也称胚胎干细胞。 全能干细胞在进一步的分化中，形成各种多能干细胞。多能干细胞具有分化为多种细胞组织的潜能，但却失去发育成完整个体的能力，如神经干细胞。 多能干细胞进一步分化，又形成专能干细胞，这类干细胞只能向一种类型或密切相关的两种类型的细胞分化，如肌细胞。 从理论上来讲，干细胞是各类疾病的克星。 通过干细胞技术，可以把一种组织的干细胞直接移植给相应组织坏损的病人。而且，如果掌握了干细胞向某种组织细胞分化的条件，就可以在体外对干细胞进行诱导使之“定向”分化成所需的细胞，把这些分化的细胞进行筛选，把“合格”的细胞移植给病人，代替病人已坏死的细胞。 （3）细胞生物学（现代细胞学）：生物学是研究生物的结构、功能、生活史、生命现象与活动规律的科学，所以细胞生物学（cell biology）就是研究细胞的结构、功能、生活史以及各种生活活动本质和规律的科学，是生物科学的主要分支之一，也是生命科学和分子生物学研究的基础。当前细胞生物学已进入分子生物学的水平，而且从广泛的范围来说，细胞生物学应属于现代生物学教育的中心。 细胞生物学既然是生命科学研究的基础，因此，生物科学上的许多基本问题，必须在细胞中谋求解决。它的研究目的，不仅在于阐明各种生命活动的现象与本质，而且还必须进一步对这些现象和发展规律加以控制和利用，以达到为生产实践服务的目的，造福于人类。 为什么要用细胞生物学，而不用现代细胞学呢？ 因为，现代细胞学，在形态方面，已经超出了光学显微镜下可见结构的简单描述范围；在功能方面，也已经超越了对于生理变化的纯粹描述时期。近30多年来随着分子生物学的发展，新方法、新技术不断涌现，细胞研究已从细胞整体和亚细胞结构水平深入到分子水平。目前，已把细胞的整体活动水平、亚细胞水平和分子水平三方面的研究有机地结合起来，以动态的观点来考察细胞和细胞器的结构和功能，探索细胞的基本生命活动，如生长、发育、分化、代谢、免疫、繁殖、运