喀斯特地貌中碳酸酐酶微生物鉴定与特性研究-重庆理工大学学报.pdfVIP

第３１卷　第８期 重 庆 理 工 大 学 学报（自然科学） ２０１７年８月 Ｖｏｌ．３１　　Ｎｏ．８ ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｏｎｇｑｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅ） Ａｕｇ．２０１７  ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７４－８４２５（ｚ）．２０１７．０８．０１９ 喀斯特地貌中碳酸酐酶微生物鉴定 与特性研究 １ １ ２ １ １ 易　哲 ，叶姜瑜 ，李大荣 ，窦建军 ，石玉竹 （１．重庆大学 城市建设与环境工程学院，重庆４０００３０； ２．重庆融极环保有限公司，重庆４０１１２０） － 摘　　　要：碳酸酐酶（ＣＡ）广泛分布于动植物和原核生物中，可以迅速催化 ＣＯ 和 ＨＣＯ 之 ２ ３ 间的相互转化反应，而喀斯特地貌独特的环境条件非常适合微生物碳酸酐酶的表达。选取具有 典型喀斯特地貌的重庆金佛山景区的土壤样本，分离出高产碳酸酐酶菌，选取酶活性最高的一 株菌，进行革兰氏染色镜检，测定生长曲线确定稳定期，最后对其进行１６ＳｒＲＮＡ序列分析，鉴定 种属，同时探究了循环水系统的主要环境因子（温度、ｐＨ值、金属离子、阴离子）对其碳酸酐酶 活性的影响。结果表明：筛选出酶活高达２．１２Ｕ／ｍｇ的菌株Ｃ８，其为革兰氏阳性菌，呈短杆状， 于１８ｈ达到生长稳定期，Ｃ８的１６ＳｒＲＮＡ序列分析的鉴定结果为Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｐ．；Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｐ．菌ＣＡ ２＋ ２＋ ２＋ 具有良好的热稳定性，中性弱碱性环境有利于ＣＡ活性相对稳定，金属阳离子Ｃａ 、Ｍｇ 、Ｚｎ 、 ２＋ ２－ － Ｆｅ 以及阴离ＳＯ 、Ｃｌ在一定范围内可使 Ｂ．ＲＡ５１菌ＣＡ活性保持相对稳定。此研究为高产 ４ 微生物碳酸酐酶应用于循环冷却水系统提供了参考。 关　键　词：喀斯特地貌；碳酸酐酶；循环冷却水 中图分类号：Ｘ１７２　　　　文献标识码：Ａ 文章编号：１６７４－８４２５（２０１７）０８－０１１３－０７ ＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄＣｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆＢａｃｔｅｒｉｕｍｗｉｔｈ ＣａｒｂｏｎｉｃＡｎｈｙｄｒａｓｅｉｎＫａｒｓｔＬａｎｄｆｏｒｍ １ １ ２ １ １ ＹＩＺｈｅ，ＹＥＪｉａｎｇｙｕ，ＬＩＤａｒｏｎｇ，ＤＯＵＪｉａｎｊｕｎ，ＳＨＩＹｕｚｈｕ （１．ＦａｃｕｌｔｙｏｆＵｒｂａｎＣｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎａｎｄＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， ＣｈｏｎｇｑｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ４０００３０，Ｃｈｉｎａ； ２．ＣｈｏｎｇｑｉｎｇＲｏｎｇｊｉＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＣｏ．，Ｌｔｄ．，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ４０１１２０，Ｃｈｉｎａ） 　　收稿日期：２０１７－０２－１７ 基金项目：国家科技重大专项（２０１３Ｚ 作者简介：易哲（１９９１—），男，硕士研究生，主要从事环境工程微生物学研究；通讯作者 叶姜瑜（１９６３—），男，四川人， 博士，副教授，博士生