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翻译,基因表达调控
负调控和正调控 负调控(negative control) 阻遏蛋白(阻遏物)封闭结构基因转录,去除后开启转录。 正调控(positive control) 激活蛋白(激活物)活化时,结构基因转录。 乳糖操纵子 -细菌以葡萄糖为能量来源 葡萄糖充分时(优先利用): 与葡萄糖代谢有关的酶基因---表达 与其他糖代谢有关的酶基因---关闭 葡萄糖耗尽时,乳糖存在: 与乳糖代谢有关的酶基因 ---表达 与葡萄糖代谢有关的酶基因---关闭 蛋白质的生物合成 —— 翻译(p182) 翻译(translation) 是指以新生的mRNA为模板,把核苷酸的三联体遗传密码翻译成氨基酸序列,合成多肽链的过程,是基因表达的最终目的。 模板: mRNA 原料:20种编码氨基酸 氨基酸运载体:tRNA 场所:核蛋白体 酶:氨基酰-tRNA合成酶、 转肽酶 蛋白质因子:起始因子(initiation factors, IF;eIF) 延长因子(elongation factors, EF) 释放因子(release factors, RF) 核蛋白体释放因子(ribosomal release factors, RRF) 蛋白质生物合成体系 mRNA是翻译的直接模板 开放阅读框架(open reading frame ,ORF) mRNA从5’ → 3’方向,由起始密码子到终止密码子的序列,称为一个开放阅读框架。 遗传密码(genetic codon) 开放阅读框架内每3个碱基组成的三联体,决定一个氨基酸,称为遗传密码。 遗传密码的特点 (一)连续性(commaless) (二)方向性(sideness) (三)简并性(degeneracy) (三)摆动性(wobble) (四)通用性(universal) (五)偏爱性(bias or preference) AUG UGA UAA UAG 开放阅读框架 Open Reading Frame -GACUACAAGGUAUGCCCUUGCUUCACAUGUAAACGC- mRNA 翻译起始点 5’非翻译区 3’非翻译区 起始密码AUG 终止密码UAA、UAG、UGA mRNA上从翻译起始点开始,三个碱基编码一个氨基酸。从起始AUG密码到终止密码(UAA)前的序列,代表整个一条多肽链的氨基酸信息,称为“开放阅读框架”(ORF)。这些碱基的替换、插入、缺失,都可能造成密码的混乱和氨基酸序列的改变,称为“frame shift,或者框移”。 核蛋白体是肽链合成的场所 核蛋白体由大、小亚基组成,每个亚基含有不同的蛋白质和rRNA,原核生物和真核生物又各有不同。 30S 60S 40S 50S 70S 80S 肽链合成的“装配机”-核蛋白体 大亚基 转肽酶与GTP酶活性 小亚基 mRNA与tRNA结合的识别 SD序列(Shine-Dalgarno) 原核生物特有的、位于mRNA上起始密码子上游的一段富含嘌呤(AGGA)碱基的短序列,是mRNA与核糖体小亚基结合位点,直接影响翻译效率,又称为核蛋白体结合位点(ribosomal binding site,RBS)。 密码子 反密码子 氨基酰-tRNA合成酶--氨基酰-tRNA Thr Tyr 蛋白质因子:起始因子(initiation factors, IF;eIF) 延长因子(elongation factors, EF) 释放因子(release factors, RF) 小亚基 大亚基 mRNA 5’ 3’ 氯霉素:作用于大亚基,阻断延伸 链霉素和卡那霉素:作用于小亚基,使构象改变,引起读码错误 S 四环素:抑制氨基酰tRNA与核蛋白体的结合 IF2 干扰素:诱导eIF2磷酸化。 蛋白质生物合成的阻断剂 翻译后加工 翻译后加工(post-translational processing) :肽链从核蛋白体释放后,经过细胞内各种修饰处理,成为有活性的成熟蛋白质的过程。 一级结构的修饰 高级结构的修饰 靶向输送 胰岛素 图14-14 胰岛素的基因、转录和翻译产物 斜线示内含子; S: 信号肽; A,B: 胰岛素的A链和B链; C: C肽; Pre: 前导序列 蛋白
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