基质辅助激光解吸附飞行时间质谱分析缩合单宁的阳离子化问题.pdfVIP

第34 卷 分析化学 （FENXI HUAXUE ） 研究简报 第7 期 2006 年7 月 Chinese JOurnai Of Anaiyticai Chemistry l0l9 ~ l022 基质辅助激光解吸附飞行时间质谱分析 缩合单宁的阳离子化问题 l l，2 l，2 l ＊ 向平 林益明 林 鹏 向成 l （厦门大学生命科学学院生物学系，厦门36l005 ） 2 （厦门大学湿地与生态工程研究中心，厦门36l005 ） 摘 要 以单价金属离子Cs + 和Na + 作为离子化试剂，对3 种缩合单宁进行基质辅助激光解吸附飞行时间 MALDI-TOF ）质谱分析。加入Na + 作为阳离子化试剂，能得到较高质量的质谱图。但由于实验通道中几乎 （ 不可能完全去除的K + 的干扰而会高估棓儿茶酚/ 表棓儿茶酚单元的组成比例，从而影响对棓儿茶酚/ 表棓儿 茶酚单元存在与否的判断；选择Cs + 作为阳离子化试剂可以避免此问题，但在复杂的缩合单宁分析中，同样因 为杂质离子Na + 和K + 的干扰而使得质谱图变得更复杂；未去离子处理直接对缩合单宁进行MALDI-TOF 质 谱分析与去离子并加入Cs + 的处理比去离子并加入Na + 能检测到更高聚合度的高聚物，检测到离子峰强度最 高的聚合物随离子不同而不同。 关键词 缩合单宁，基质辅助激光解吸附飞行时间质谱，黄烷-3-醇单元，聚合度 ! 引 言 ［l］ 缩合单宁（cOndensed tannins ）是一类分子量在500 ~ 3000 的典型植物多酚（POiyphenOis ） 。在植 物防御、协同进化和包括凋落物分解、营养循环、氮素代谢、微生物活动、腐殖质的形成、金属的络合及成 土作用等生态过程中具有非常重要的作用［2 ］。要研究缩合单宁的生理和生态功能，对其结构的分析测 定是先决条件。近年来，基质辅助激光解吸附飞行时间质谱（MALDI-TOFMS ）作为一种软离子化质谱技 术被广泛地应用于生物大分子聚合物和合成高分子的分析，也是分析多分散植物缩合单宁聚合物的理 想方法［3 ，4 ］。 在缩合单宁的MALDI-TOF 质谱分析中，除了基质、溶剂和样品制备方法外，实验通道中丰富的 + + ［5 ］ Na 、K 以及作为阳离子化试剂加入的单价金属离子也是分析成败的关键 。近年来，在应用MALDI- TOF 质谱对植物缩合单宁的结构分析中发现，即便得到较高质量的质谱图，也会因为离子的选择不当和 杂质离子的干扰而影响对缩合单宁结构信息的准确获取，特别是在将该技术应用于研究植物化学分类、 植物多酚的次生代谢和缩合单宁的地球化学循环等方面。在其它分析方法未能够对MALDI-TOF 质谱 所得到的缩合单宁结构信息进行验证的情况下，必须首先认识离子化试剂所引起的问题。本研究通过 引入典型的单价金属离子Cs + 和Na + ，并在对比控制杂质离子的条件下，对结构差异较大的几种缩合单 宁进行MALDI-TOF 质谱分析，以阐明MALDI-TOF 质谱在分析缩合单宁时重要的几个阳离子化问题。 # 实验部分 # . ! 仪器、试剂和样品 Bruker RefieX ! 基质辅助激光解吸附飞行时间质谱仪（德国Bruker 公司）；旋转蒸发仪；冷冻干燥 机（北京德天佑）。实验所用丙酮、甲醇和氯仿等均为分析纯；Amberiite IRP-64 离子交换树脂（Sigma ）； 三氟醋酸铯纯度为 99% （Fiuka