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银叶蓝钟花茎尖组织培养研究 Study on Meristem Culture of Cyananthus argenteus Marq 云南农业大学 园林园艺学院2006级 摘 要 以银叶蓝钟花茎尖为外植体，以期筛选出诱导愈伤组织分化和丛生芽生根的最佳培养基。同时研究了银叶蓝钟花组织培养中材料的消毒时间对消毒效果的影响。试验结果表明，培养基MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.05mg/L是愈伤组织诱导分化相对较好的培养基；培养基MS+6-BA0.3mg/L+NAA0.6mg/L是银叶蓝钟花生根培养较好的培养基。在以75%的酒精消毒30秒后，用0.1%的升汞消毒8分钟，对实验材料的消毒效果相对较好。 关键词：银叶蓝钟花；消毒时间；诱导率；玻璃化 ABSTRACT The meristem tip of Cyananthus argenteus Marq as explants to induce callus selected and multiple shoots the best medium for rooting. At the same time of Cyananthus argenteus Marq spent tissue culture material disinfection time disinfectant effect. Design test results showed that the medium MS +6- BA3.0mg / L + NAA0.05mg / L is a relatively good differentiation of callus induction medium; medium MS +6- BA0.3mg / l + NAA0.6mg / L, is a suitable medium for rooting ，75% alcohol at 30 seconds after disinfection with 0.1% HgCl2 for 8 minutes, the experimental materials, sterilization was better. Key words: Cyananthus argenteus Marq; time of disinfecting?; inductivity; vitrification? 银叶蓝钟花茎尖组织培养研究 前言 材料与方法 结果及分析 讨论 结论 系统概述 前言 ①银叶蓝钟花（Cyananthus argenteus Marq）又名总花蓝钟花，为桔梗科（Campanulaceae）蓝钟花属（Cyananthus Wall）植物。蓝钟花属是中国喜马拉雅区系的典型植物。 ②蓝钟花属是桔梗科中唯一一个子房完全上位的属。从子房对花萼和花冠来说均上位，其在本科中是一个比较特殊的成员，可能是该科中一个较为原始的类型。 ③银叶蓝钟花，多年生草本，茎多条簇生，长15-25cm，小枝纤细，叶互生，狭披针形，背面密被银白色棉毛或刚毛。 具短柄，花单生于茎顶，花梗极短，花萼管状，萼齿狭三角形，花冠管状，蓝紫色，裂片狭长圆形。 2.2 试验时间 实验于2009年4月到2010年5月在云南农业科学院花卉研究所内进行。 将采回的生长良好的茎尖进行消毒，接种到培养基中，观察记录。 2.3 试验方式 2.3.1 材料消毒处理 用自来水冲洗材料，洗净表面的尘土，置于超净工作台上，以75%的酒精消毒30秒时间，再用无菌水冲洗3次，将材料分组分别用0.1%升汞消毒6分钟、8分钟、10分钟，再用无菌水冲洗4次。 2.3 试验方式 2.3.2 初代培养 将消毒处理过的材料，接种到培养基中。培养基以MS为基本培养基，添加以6-BA,NAA(双因子)不同浓度组合的植物激素，调节PH到5.7-5.8。设计9个浓度梯度1-9（见表一），在每一种浓度梯度下接种十瓶。培养温度为23℃，光照强度为3000lx,每日光照14个小时。 2.3 试验方式 表一（6-BA与NAA双因子不同组合的九个浓度梯度） Table 1 (6-BA and NAA combinations of nine different two-factor concentration gradient) NAA与6-BA配合 6-BA3.0(mg/L) 6-BA4.0(mg/L) 6-BA5.0(mg/L) NAA0.05(mg/L) ① ② ③ NAA0.1( mg/L) ④ ⑤ ⑥ NAA0.2( mg/L) ⑦ ⑧ ⑨ 统计公式： 愈伤组织诱