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血管活性肠肽对慢性阻塞性肺疾病患者PBMC中NFκB及TNFα的影响
中文摘要
血管活性肠肽对慢性阻塞性肺疾病患者
PBMC中NF.KB及TNF.仅的影响
摘 要
目的:慢性阻塞性肺疾病(Chronicobstructive
pulmonary
近年来随着对COPD炎症的研究日益深入,发现多种炎性细
胞、细胞因子参与了COPD的发生发展。抑制炎细胞活性已
的活性和炎症因子的合成起很重要作用。抑制NF.KB活化,
可抑制炎细胞释放炎性介质,最终抑制炎症反应的瀑布效
应。
分子物质,可以激活炎症细胞中炎症转录因子的活性,诱导
促炎因子的大量生成,放大炎症反应。
imestinal
血管活性肠肽(vasoactive
广泛存在于中枢和周围神经系统重要的神经肽,具有广泛的
生物学作用。VIP[jN性神经纤维广泛分布于呼吸道内,VIP
作为非肾上腺素能非胆碱能抑制性神经递质或神经调节因
子,参与呼吸道多种生物学功能的调节,其中包括抑制炎细
胞的活性。大量研究表明VIP能抑制炎细胞释放多种炎性介
质,其部分机制是通过阻止核转录因子NF.KB的活化而实现
的。而VIP是否对COPD同样有抗炎作用如何目前还不清楚。
中文摘要
bloodmononuclear
变化,从细胞水平上探讨VIP对COPD的抗炎作用,为临床应
用VIP或其模拟物治疗COPD提供理论依据。
方法:
究对象,两组在性别、年龄和吸烟指数均有可比性。无菌条
件下,抽取两组人群肘静脉血5 u/m1)
m1,置于肝素抗凝(25
管中,应用淋巴细胞分离液,分离出PBMC。
1 免疫细胞化学方法检测单个核细胞内NF.KB的表达.将
置入48孔培养板中,每孔O.5ml。COPD组随机分为4组:
LPS终浓度为1
为10{M的VIP,20分钟后加入终浓度为1
mg/L的LPS。
正常组仅用1640培养液培养。上述配好的液体分别培养1.5
min
小时后收集细胞,离心(800 4C),弃去上清,
rpm,10
甩片干燥,冷丙酮固定,做免疫细胞化学,检测单个核细胞
内NF-rd3
p65的表达。
2放射免疫方法检测细胞上清液中的TNF.0【的浓度:提取
出的单个核细胞用无血清1640培养液调节细胞浓度为
2.O×106个/ml置入48孔培养板中,每孔O.5ml。随机分为4
10母M、lO培M、10‘7
1
20分钟后加入终浓度为1
中文摘要
养液培养。各组分别培养8小时后,4。C低温水平离心机离
心(2000 min),取细胞上清,.80。C保存,放射免疫
rpm,5
法检测TNF.0【的含量。
3 应用SPSSl3.0软件对结果进行统计学处理,数据以均数
士标准差(i±譬)表示。正常组与COPD的空白对照组比较
采用两样本t检验,COPD各组间比较采用单因素方差分析
(One
way
结果:
l 免疫细胞化学结果表明:①正常组NF.r._Bp65蛋白表达水
中,四组细胞核中NF.r.B
p65蛋白表达水平比较,有明显差
p65蛋
p65
VIP+LPS组比较,差异
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