血红蛋白电泳对于β-地中海贫血的筛查价值.docVIP

精品论文 参考文献 血红蛋白电泳对于β-地中海贫血的筛查价值 张德才1 张洪为(通讯作者)2 (1攀钢西昌医院检验科 615012；2泸州医学院附属医院输血科 646000) 【摘要】目的:对beta;-地中海贫血(beta; thalassemia，beta;-TM)患者的血红蛋白电泳结果进行分析，探讨血红蛋白电泳对于beta;-TM患者的临床意义。方法：分析149例beta;-地中海贫血患者的血红蛋白电泳结果红细胞平均体积(mean corpuscular volume，MCV)、血红蛋白A2(hemoglobin A2,HbA2)、胎儿血红蛋白(fetal hemoglobin ,HbF)。结果：149例疑为beta;-TM的患者经过血红蛋白电泳后，阳性患者为78例，阴性患者为71例；经过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)检测，阳性为45例，阴性为104例；血红蛋白电泳这种检测方法的灵敏度为95.96%、特异度为66.35%、阳性预测值为55.13%以及阴性预测值为97.18%。结论：血红蛋白电泳这种检测方法对于beta;-TM的筛查有较高的诊断灵敏度，可以满足临床上面对于beta;-TM的筛查需求。 【关键词】 beta;-地中海贫血 血红蛋白电泳 聚合酶链式反应 【中图分类号】R457 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）18-0283-02 beta;-地中海贫血(beta; thalassemia，beta;-TM)也被称作beta;-珠蛋白生成障碍性贫血，是由于遗传基因缺陷导致血红蛋白当中至少一种珠蛋白合成缺少或者不足[1]，引起的贫血或者病理的状态，是珠蛋白生成障碍性贫血中发病率最高的一种类型，是世界上常见的单基因遗传性疾病，是常染色体上面的隐形遗传，在我国的南方一些城市：昆明、泸州、桂林、南宁、贵阳等多见[2]。目前对于beta;-TM的治疗仍是医学界的一个重大难题，对于beta;-TM的出生缺陷干预工作是首要任务。那么对于成人的beta;-TM，尤其是携带者的筛查尤其的重要。 1 资料和方法 1.1 资料来源 所有的标本均来自于2013年2月-2014年1月来我院并且疑为beta;-TM的患者共计为149例，其中男性患者：88例，女性患者：61例。年龄为6个月-60岁。标本均采集于血常规的试管中。 1.2 试验方法 血红蛋白电泳：使用醋酸纤维薄膜法来分离血红蛋白，操作步骤按照临床检验操作规程的第二版[3]：使用生理盐水洗涤红细胞5次，用有机溶剂四氯化碳萃取后来制备Hb溶液，经过稀释以后调整Hb含量为10g/L左右，进行点样电泳、染色后经过洗脱和比色检测HbF和HbA2，判定为beta;-TM阳性结果的标准是：MCV﹤80fL， HbA2＞3.2%，HbF＞3.1%[4]。 聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)：应用PCR来检测并且诊断beta;-TM，将其检测提高到一个分子水平。它主要包括DNA的提取、PCR反应两个步骤：在PCR中设置的参数是：95℃，10min; 94℃，1min;55℃，30sec;72℃，30sec;35个循环，反应体系设定为：25mu;L。以上PCR的操作由经过国家分子生物学PCR正规培训并且合格的专业技术人员来进行操作。所有的操作都符合标准技术操作规程。 1.3 主要仪器和试剂 电泳仪(DYY—8C，北京六一仪器厂)；分光光度计(722，上海精密仪器有限公司)；PCR分析仪(7500 Fast real-time,美国罗氏公司)； PCR应用亚能公司的试剂盒。 1.4 数据分析 采用Excel 2007软件对检出的构成比和各种比率资料进行整理和统计。 2 结果 149例疑为beta;-TM的患者经过血红蛋白电泳后，阳性患者为78例，阴性患者为71例；经过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)检测，阳性为45例，阴性为104例；血红蛋白电泳这种检测方法的灵敏度为95.96%、特异度为66.35%、阳性预测值为55.13%以及阴性预测值为97.18%。 表1 149例患者进行血红蛋白电泳