血红蛋白释放试验与轻型β-地中海贫血.docVIP

精品论文 参考文献 血红蛋白释放试验与轻型β-地中海贫血 梁树坚 　　（增城市茘城街社区卫生服务中心 511300） 　　【摘要】目的 通过血红蛋白释放试验，轻型beta;-地中海贫血之间的关系研究，对其意义进行探讨。方法 选取2011年1月-2013年6月我院轻型beta;-地中海贫血患者的红细胞作为标本，进行淀粉-琼脂糖混合凝胶电泳，观察红细胞中血红蛋白在第一次、第二次、第三次等多次电泳之后的释放情况。结果 血红蛋白在第二次电泳的过程中又从原点释放出来，而释放出的血红蛋白，轻型beta;-地中海贫血患者与其他标本明显较多。结论 红细胞中的血红蛋白经过第一次电泳，大部分已经被释放，但是在第二次电泳的过程中仍然发现有血红蛋白被释放出来，说明血红蛋白在红细胞中的存在状态很有可能不同，这一发现有利于我们对血红蛋白的进一步认识和研究。 　　【关键词】轻型beta;-地中海贫血 血红蛋白 红细胞 释放试验 　　【中图分类号】R599 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）05-0145-01 　　血红蛋白存在于红细胞中，成人的红细胞中血红蛋白的存在形式有两种，一种是HbA，另一种是HbA2。早在上个世纪八十年代，有研究人员采用淀粉-琼脂糖混合凝胶电泳进行红细胞的检测时，观察发现其中释放出了血红蛋白，并发现HbA2不同于溶血液者，从而大胆推测HbA与HbA2相结合的形式在红细胞中存在，并将这种现象称为“HbA2现象”。为了进一步对“残留-再释放”现象进行论证，我们对其检测方法进行了研究和探讨。 　　1.材料与方法 　　1.1 一般资料 选取2011年1月-2013年6月，在我院接受检查的轻型beta;-地中海贫血患者作为本次研究的群体，采集红细胞作为标本。全血计数及测定红细胞指数结果如下：HGB值为每升115g，MCH值为21,89pg，RBC值为每升5.23times;1012，WBC每升为4.92times;109，PLT值为每升212times;109，LYM值为每升22times;109，MCHC每升为315g，MXD为0.51times;109/L，MCV为69.67fL，MPV为10.02fL，RDW值为43.03fL，PDW值为14.28fL，NEUY值为每升2.2times;109，LYM为0.45%，MXD值为0.09%，P-LCR值为0.28。给予常规血红蛋白凝胶电泳百分之二十八HbA，检测中没有发现血红蛋白，HbF也没有呈现出增多的现象。以及同期住院的肝硬化患者、急性淋巴细胞白血病患者、轻型beta;-地中海贫血患者的家属作为本研究的对比人群。 　　1.2 方法 首先，将采集到的轻型beta;-地中海贫血患者的红细胞标本，加在凝胶的阴极侧，加辅过程中可以借助滤纸，规格为3mm；第一次电泳，设置5V/cm，时间为6小时，其中时间间隔设置为2小时通电、30分钟停电，之后30分钟的通、停电交替。电泳时间合计达到6小时后进行染色，采用联苯胺，最后留图，完成单项电泳。第二次电泳，将方向调整90deg;，利用第一次电泳的方法进行操作，30分钟通、停电交替，时间合计为6小时，最后进行染色和留图，仍然使用联苯胺进行染色操作，完成双向电泳。 　　2.结果 　　所采集的轻型beta;-地中海贫血患者的红细胞标本，经过单向第一次电泳之后，发现有较多的血红蛋白仍然存留在原点，经过第二次电泳、第三次电泳，可以发现这些残留的血红蛋白逐渐的释放出来，并且呈现出梯带/竹节带，带状非常明显的由上向下显示出来。经过双向电泳，同样发现较多的血红蛋白在电泳第一次后残留原点，与单向电泳相似，在第二次电泳后，残留的血红蛋白逐渐被释放，并且呈现出梯带或者竹节带，带状非常明显的由上向下显示出来。对于轻型beta;-地中海贫血患者的个别家属，以及急性淋巴细胞白血病患者的红细胞标本电泳结果与轻型beta;-地中海贫血患者类似，肝硬化患者、原发性肝癌患者的红细胞标本电泳检测中，残留和释放血红蛋白有的增多，有的减少。 　　3.讨论 　　血红蛋白是高等生物体内负责运载氧的一种蛋白质,也是红细胞中唯一的一种非膜蛋白。人体内的血红蛋白由四个亚基构成，分别为两个alpha;亚基和两个beta;亚基，在与人体环境相似的电解质溶液中血红蛋白的四个亚基可以自动组装成alpha;2beta;2的形态。轻型beta;-地中海贫血症状非常轻，甚至没有不舒适，平常注意休息和营养，适当补充叶酸和维生素E，定期检查血常规。有研究发现，淀粉-琼脂糖混合凝胶电泳能够从某种角度证明, HbA2在RBC 中可能并非游离存在。为了研究血红蛋白与轻型b