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血缘乌鸡口服液的致突变性及致畸性研究
精品论文 参考文献
血缘乌鸡口服液的致突变性及致畸性研究
蒋中仁 徐 薇 金 伟 敬明武 葛宇杰 周 静 卢润生 陈琼瑶
(四川省疾病预防控制中心毒理所 四川成都 610041)
【中图分类号】R155 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085 (2010)17-0022-02
【摘要】 本实验采用精子畸形试验、微核试验、Ames试验和大鼠传统致畸试验方法,对血缘乌鸡口服液的致突变性和致畸性进行了研究,结果显示,在本实验条件下,血缘乌鸡口服液未见致突变性和致畸性。
【关键词】 乌鸡 致突变性 致畸性
国家食品安全法强调了食品质量和食品安全的重要性,食品质量和食品安全直接关系着身体健康和生命安全,这也是大家最为关注的。血缘乌鸡口服液是由乌鸡、乳酸亚铁、元肉等为主要原料加工而成的具有改善缺铁性贫血功能的一种营养保健口服液,其有关毒理学资料尚未见报道。本文就致突变性和致畸性进行了研究,为其安全性评价提供依据。
1 材料和方法
1.1受试物及主要试剂 血缘乌鸡口服液由某保健品有限公司提供,成人每日推荐量为60ml/60Kg.BW,试验前将样品低温常压浓缩4倍,其浓缩液作为实验样品,再用蒸馏水作溶剂配制成各相应浓度的溶液。环磷酰胺(CP)由上海华联制药有限公司生产,敌枯双来源于华西医科大学,叠氮化钠(NaN3)由沈阳化学试剂厂生产,丝裂霉素C(MMC)由浙江海正药业股份有限公司生产,4-硝基喹啉-N-氧化物和二氨基芴(2-AF)均为进口分装,1,8-二羟基蒽醌由中国药品生物制品测定所生产。
1.2 动物及菌种 昆明种小鼠和健康性成熟未交配过的SD大鼠均由四川大学华西实验动物中心提供,动物合格证号分别24101113。Ames试验菌种TA97、TA98、TA100、TA102均来源于中国疾病预防控制中心营养与食品安全所。
1.3小鼠精子畸形试验[1] 试验设2500mg/Kg.BW、5000mg/Kg.BW、10000mg/Kg.BW3个剂量组及阴性对照组和阳性对照组。每天经口给药1次,连续给药5d,于首次给药后35d脱颈椎处死动物,取双侧附睾按规范要求进行制片、固定、染色、镜检。结果用秩和检验进行处理。
1.4小鼠骨髓细胞微核试验[1] 试验设2500mg/Kg.BW、5000mg/Kg.BW、10000mg/Kg.BW3个剂量组及阴性对照组和阳性对照组,每组雌雄各5只昆明种小鼠,采用间隔24h两次给药法,结果用泊松分布U检验进行处理。
1.5Ames试验[2] 采用标准平板渗入法,受试物设5个剂量,另设蒸馏水溶剂对照和阳性对照,在加和不加S9的条件下,各剂量每个菌种同时作3个平板,试验重复1次,以回变菌落数超过自发回变菌落数的2倍以上为阳性。
1.6大鼠传统致畸试验[2] 实验设1250mg/Kg.BW、2500mg/Kg.BW、5000mg/Kg.BW 3个剂量组、蒸馏水阴性对照组和敌枯双阳性对照组,于妊娠第7-16d,将受试物每天经口灌胃给予受精鼠。妊娠第20d称体重后股动脉放血处死孕鼠,称子宫总重(包括胎鼠),记录总着床数、活胎数、死胎数及吸收胎数,称活胎重并量身长。逐个检查胎鼠外观,将1/2的活胎鼠经鲍音氏液固定两周后检查内脏,余下的胎鼠去掉内脏后经80%乙醇固定、茜素红S染色以及透明后检查胎鼠骨骼。
2 结果
2.1血缘乌鸡口服液对小鼠精子畸形的影响
血缘乌鸡口服液各剂量组的精子畸形率与阴性对照组比较,经秩和检验差异无显著性(P>0.05),而环磷酰胺阳性对照组的精子畸形率明显高于阴性对照组(P<0.01)。
2.2血缘乌鸡口服液对小鼠骨髓微核的影响
血缘乌鸡口服液3个剂量组的PCE微核率与阴性对照组比较,经泊布分布检验差异无显著性(P>0.05),而环磷酰胺阳性对照组的PCE微核率明显高于阴性对照组(P<0.01)。
2.3血缘乌鸡口服液的Ames试验结果
无论加与不加S9混合液,血缘乌鸡口服液各剂量组的回变菌落数与溶剂对照组接近,均未超过各菌株自发回变菌落数的2倍;而各菌株阳性对照组的回变菌落数均超过溶剂对照组的2倍以上。
2.4 血缘乌鸡口服液的致畸性研究结果
2.4.1血缘乌鸡口服液对母鼠体重及胎鼠发育的影响
各剂量组的平均活胎数、活胎平均体重、活胎身长均值及妊娠期母鼠增重与阴性对照组比较,经方差分析差异均无显著性(P>0.05),
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