新技术 禽类实验室诊断技术课件.pptVIP

酶联免疫吸附试验 【目的要求】 通过操作本试验，掌握酶联免疫吸附试（ELISA）的基本原理与方法。 了解本试验对实践生产的指导意义。 【实验原理】 禽病诊断新技术 【目的要求】 了解免疫胶体金技术、PCR技术诊断方法的原理和操作方法。 了解免疫胶体金技术、PCR技术对禽病诊断的意义。 一、免疫胶体金技术 原理 将特异性的抗原或抗体以条带状固定在膜上，胶体金标记试剂（抗体或单克隆抗体）吸附在结合垫上，当待检样本加到试纸条一段的样本垫上后，通过毛细作用向前移动，溶解结合垫上的胶体金标记试剂后相互反应，在移动到固定的抗原或抗体的区域时，待检物与之发生特异性结合而被截留，聚集在检测带上，可通过肉眼观察到显色结果。 * * 【实验材料】 （1）聚乙烯塑料板、酶联免疫吸附试验检测仪、微量移液器。 （2）包被液、洗涤液、底物稀释液、显色液、终止液、稳定液。 （3）兔抗鸡酶标抗体、抗原、待检鸡血清、阳性血清、阴性血清。 【实验方法】 【结果判定】 凡检测血清P/N值，超过1.5判为阳性（P/N值是检测标本的吸收值与一组阴性标本吸收值的比值）。如无检测仪，可用肉眼观察，反应孔颜色变成棕黄色，比正常细胞、正常血清（阴性血清）对照孔颜色（浅黄色）深者判为阳性。 【作业】 1.酶联免疫吸附试验为什么是一种较敏感的血清学方法？ 2.酶联免疫吸附试验操作时应注意哪些事项？如何判定结果？ Ag Ab