等位基因分型标准物的法医应用及制备研究..docxVIP

等位基因分型标准物的法医应用及制备研究　　【摘要】短串联重复序3~J(shorttandemrepeats，简称STR)由于其本身的优点和检测技术的不断完善，在今后相当长的时间内　　仍将是法医应用的重要遗传标记。等位基因分型标准物是STR检测试剂盒的组成部分，能够保证各等位基因分型的准确性。本文对　　等位基因分型标准物的出现、在法庭科学上的应用以及目前制备方法进行了综述，并对各种制备方法进行比较，以期对各实验室按　　照实际需要自行制备相关STR的等位基因分型标准物在方法选择上有所帮助，从而更好地进行法医物证鉴定。　　【关键词】短串联重复序列；等位基因分型标准物；法医学应用【中图分类号】Q78【文献标识码】A　　【文章编号】1007—9297(XXJ03—0231—04　　StudyontheforensicapplicationsandtheconstructionofalleHcladder．YUANli，LUdi．(BeijinginstituteofForensicMedicineand　　Science，Beijing]OOO4O,China)　　【Abstact】Shoatandemrepeats(STRs)aleimportantgeneticmarkersandwidelyusedinForensiccommunitybecauseoftheirs　　characteristicsandadvancedexaminetechniques．AllelicladderisimportantpartofSTRkitandensuretheprecisegenotypeofallelic．　　Thisarticlestatestheappearanceandforensicapplicationofallelicladder，andalsostudyonthemethodsofconstructionofallelicladder　　currently、Throughthecomparisonsofthoseconstructionmethods，thisissuetobesolvedthelaboratorytoselectwhichmethodtoconstruc—　　tionallelicladderaccordingitsneedsandconditionandtomakethemostoftheforensicjudge．　　【KeywordslShorttandemrepeats；Allelicladder；Forensicapplication一、等位基因分型标准物的出现　　PCR—STR分型技术具有高效、快速、灵敏等优点，　　在个人识别、亲子鉴定、基因绘图上发挥了重要作　　用．【l】已经成为法医物证鉴定的主流技术。虽然单核苷　　酸多态性(singlenucleotidepolymorphism，即SNP)　　被广泛称为第三代DNA遗传标记，但由于其成本高，　　实际操作困难等．推广使用还需要很长一段时间。目　　前和今后相当长的时期内STR仍是主要使用的遗传标记。　　当使用以PCR为基础的STR多态性的分析技术　　时。为了各基因座的等位基因命名，需要一个能比对　　的标准物。早先测试STR的等位基因命名曾采用片断　　长度bp值方法，是与已知分子量标准物同步电泳并　　进行比较。这种分子量标准物虽然在本质上也是　　DNA但经多次实验发现这种方法存在较严重的缺　　陷：相同分子量的DNA片段和分子量标准在同一介　　质电泳时会出截然不同迁移率的条带。【31DNA在介质　　中的电泳迁移率在其他条件相同的情况下不仅与其　　分子量有关，还受DNA自身的序列结构影响。序列不　　同的DNA片断在电泳动力学上存在差异，即使片断　　长度相同．它们的电泳迁移率却不一致。这样就不能准确进行STR分型。　　最早记载有等位基因分型标准物的是Budowle　　等[41建立的。他们从100名无关个体中找出D1S80的　　16个等位基因．经测序命名后把它们混合作为“lad．　　der”．检测未知样品时．只需与该基因座的“ladder”比　　较即可得出这个基因座的基因型．当时用的是聚丙烯　　酰胺凝胶电泳分离和银染显色。这种检测方法与在此　　之前的斑点杂交和SoutheYn印迹技术来检测限制性　　片段长度多态性方法相比有很多优点。在节约时间和　　降低错误率上尤为明显。MargaretC等在1996年通过　　不同分型标准物的比较．进一步证明使用等位基因分　　型标准物(allelieladders)才能对等位基因进行正确分型，其数据才可以在实验室之间进行交换。圈二、等位基因分型标准物的概念及法医学应用　　等位基因分型标准物(allelieladder)是人