皖南地区眼镜蛇毒活性组分镇痛效应的初步研究.pdf

·１５０· 中国病理生理杂志　ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＰａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ　２０１３，２９（１）：１５０１５４ ［文章编号］　１０００４７１８（２０１３）０１０１５００５ 皖南地区眼镜蛇毒活性组分镇痛效应的初步研究 １ １ １ １，２ １，２ １△ 闵志雪 ，　黄　璐 ，　孙　瑶 ，　包鹏举 ，　王海华 ，　张根葆 １ ２ （皖南医学院 蛇毒研究所，生理教研室，安徽 芜湖２４１００２） 　　［摘　要］　目的：从皖南地区眼镜蛇毒粗毒中分离纯化出活性组分眼镜蛇毒镇痛因子（ｃｏｂｒａｖｅｎｏｍａｎａｌｇｅｓｉｃ ｆａｃｔｏｒ，ＣＶＡＦ），并研究其镇痛效应。方法：采用阳离子交换色谱（ｃａｔｉｏｎｅｘｃｈａｎｇｅｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ＣＥＣ）和分子排阻 层析（ｓｉｚｅｅｘｃｌｕｓｉｏｎｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ＳＥＣ）从眼镜蛇粗毒中分离纯化出镇痛活性组分ＣＶＡＦ，ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电 泳法和毛细管区带电泳法进行纯度及相对分子量的鉴定；将小鼠随机分为生理盐水正常对照组和盐酸吗啡阳性对 照组、ＣＶＡＦ实验组，采用小鼠热板法和醋酸扭体法评估活性组分ＣＶＡＦ的镇痛效应。结果：纯化后得到活性产物 为单一组分，相对分子量为６５００Ｄ；热板法显示吗啡组在给药０．５ｈ后达高峰，６ｈ镇痛作用消失；活性组分ＣＶＡＦ 的镇痛作用自用药后０．５ｈ开始，且持续８ｈ仍存在。扭体法中０．０３ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ和０．３ｍｇ／ｋｇ的活性组分在 给药后小鼠扭体抑制率分别为２７％、５０％和７０％；０．３ｍｇ／ｋｇ实验组与吗啡组相比无明显差异（Ｐ＞０．０５）。结论： 从皖南地区眼镜蛇粗毒中分离纯化出的活性组分ＣＶＡＦ具有剂量依赖性镇痛效应。 ［关键词］　眼镜蛇毒；镇痛 　　［中图分类号］　Ｒ３６３　　　　　［文献标志码］　Ａ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－４７１８．２０１３．０１．０２６ ＡｎａｌｇｅｓｉｃｅｆｆｅｃｔｏｆａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｆｒｏｍｃｒｕｄｅｃｏｂｒａｖｅｎｏｍｉｎＷａｎｎａｎ ａｒｅａ １ １ １ １，２ １，２ ＭＩＮＺｈｉｘｕｅ，ＨＵＡＮＧＬｕ，ＳＵＮＹａｏ，ＢＡＯＰｅｎｇｊｕ ，ＷＡＮＧＨａｉｈｕａ ，ＺＨＡＮＧ １ Ｇｅｎｂａｏ １ ２ （ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＳｎａｋｅＶｅｎｏｍ，ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，ＷａｎｎａｎＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｗｕｈｕ２４１００２，Ｃｈｉｎａ．Ｅｍａｉｌ：ｚｇｂ８５８ ＠１６３．ｃｏｍ） 　　［ＡＢＳＴＲＡＣＴ］　ＡＩＭ：ＴｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅａｎａｌｇｅｓｉｃｅｆｆｅｃｔｏｆａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｆｒｏｍｃｏｂｒａｖｅｎｏｍｉｎＷａｎｎａｎａｒｅａ． ＭＥＴＨＯＤＳ：Ｔｈｅａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｗａｓｐｕｒｉｆｉｅｄｆｒｏｍｃｒｕｄｅｖｅｎｏｍｏｆｃｏｂｒａｂｙｃａｔｉｏｎｅｘｃｈａｎｇｅｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙａｎｄｓｉｚｅ ｅｘｃｌｕｓｉｏｎｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ．ＴｈｅｐｕｒｉｔｙａｎｄｍｏｌｅｃｕｌａｒｗｅｉｇｈｔｏｆｔｈｅａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＳＤＳｐｏｌｙａｃｒｙｌａｍ ｉｄｅｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓａｎｄｃａｐｉｌｌａｒｙｚｏｎｅｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ．Ｔｈｅａｎａｌｇｅｓｉｃａｃｔｉｖｉｔｙｗａｓａｎａｌｙｚｅｄｂｙｈｏｔｐｌａｔｅｔｅｓｔａｎｄａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄｗｒｉｔｈｉｎｇｔｅｓｔ．Ｎｏｒｍａｌｓａｌｉｎｅａｎｄｍｏｒｐｈｉｎｅｗｅｒｅｕｓｅｄａｓｃｏｎｔｒｏｌｓ．ＲＥＳＵＬＴＳ：Ａｓｉｎｇｌｅａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｗａｓｏｂｔａｉｎｅｄ