饲料中黄曲霉毒素的测定 免疫亲和层析净化荧光光度法DB34T 813-2008.pdfVIP

ICS 备案号： DB34 安 徽 省 地 方 标 准 DB34/T 813—2008 饲料中黄曲霉毒素的测定 免疫亲和层析净化荧光光度法 2008-08-01 发布 2008-08-01 实施 安徽省质量技术监督局 发布 DB34/T 813—2008 前 言 本标准由安徽省畜牧兽医局提出。 本标准由安徽省质量技术监督局批准。 本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：安徽省兽药饲料监察所。 本标准主要起草人：张莉、丁在亮、刘红云、刘发全。 本标准自2008年8月1日首次发布。 I DB34/T 813—2008 饲料中黄曲霉毒素的测定 免疫亲和层析净化荧光光度法 1 范围 本标准规定了免疫亲和层析净化荧光光度法测定饲料中黄曲霉毒素的条件和详细分析步骤。 本标准适用于饲料中配合、浓缩饲料和单一饲料中黄曲霉毒素的测定。 免疫亲和层析净化荧光光度法测定黄曲霉毒素B +B +G +G 总量，检出限为1µg/kg。 1 2 1 2 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的 修改单 （不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T 6682-1992 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 14699.1-1993 饲料采样方法 3 原理 试样经过甲醇+水提取，提取液经过滤、稀释后，滤液经过含有黄曲霉毒素特异抗体的免疫亲和层 析净化，黄曲霉毒素交联在层析介质中的抗体上，此抗体对黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2具有专一性。用 水将免疫亲和柱上杂质除去.以甲醇通过免疫亲和层析柱洗脱，加入溴溶液衍生，以提高测定灵敏度。 洗脱液通过荧光光度计测定黄曲霉毒素 (B1+B2+G1+G2)总量。 4 试剂和溶液 所有试剂除非另有规定，仅使用分析纯试剂、超纯水 4.1 甲醇(CH0H):色谱纯。 3 4.2 甲醇+水(7+3):取70 ml 甲醇加 30 ml 水。 4.3 甲醇+水(8+2):取80 ml 甲醇加 20 ml 水。 4.4 氯化钠(NaCl)。 4.5 磷酸氢二钠(Na HPO ) 。 2 4 4.6 磷酸二氢钾(Na HPO )。 2 4 4.7 氯化钾(KCl)。 4.8 溴溶液储备液(0.01%):称取适量溴，溶于水，配成 0.01%的储备液，4℃避光保存。 4.9 溴溶液工作液(0.002%):取 10ml 0.01%的溴溶液加入 40ml 水混匀，于棕