药物所研究生课件 皂苷.pptVIP

皂苷类化合物 * * 皂苷类化合物 一、概 述 1.定义：皂苷（Saponins）是一类结构复杂，分子量较大的苷类，其组成为：糖部分与三萜或甾体苷元，经典的定义是基于皂苷具有表面活性，许多皂苷能在水中振摇产生持久性的泡沫，与肥皂溶液相似，因此，被称作皂苷。 许多中草药中含有皂苷，如人参、黄芪、商陆、葱木、重楼、三七等，有的其有效成分就是皂苷。 一、概 述 2.研究概况： 1927年出了第一部专著：Saponine by Kofler 书中详细地论述了皂苷的性质和药理作用，但在当时没有一种皂苷的结构被确定。 50年代至70年代末共发现皂苷（已确定结构）仅数十种。其原因：分离、结构测定均有相当难度。 70年代以后，随着分离技术的更新（反相层析、液液层析DCCC），尤其13CNMR及其随后的各种波谱新技术出现，使皂苷的分离纯化、结构测定（主要是指多糖皂苷）成为可能。 至今共发现新皂苷1600余种。 冰醋酸、浓H2SO4、醋酐试剂（Liebermann-Burchard反应） Molish反应（浓H2SO4，α-萘酚） 溶血试验 泡沫试验 磷钼酸或硅钨酸试剂 碘蒸汽 二、皂苷的检识 根据苷元的不同可分为以下三类 三萜皂苷 甾体皂苷 甾体生物碱皂苷 三、分 类 三、分 类 Triterpene class 3 28 Steroid class Steroid alkaloid class 四、皂苷的提取与分离 药材 甲醇或乙醇或水或醇-H2O（70%EtOH） 浓缩 药渣 浸膏 石油醚脱脂（或在提取之前脱脂） 脱脂后的浸膏溶于或悬浮于水中 水液 水饱和正丁醇萃取，回收正丁醇 粗皂苷 总皂苷 溶于水中 丙酮或乙醚沉淀 XAD-2,8 大孔吸附树脂柱 D：101，RA 水洗净，不同浓度醇洗 总皂苷 2、分离 普通柱层 硅胶吸附层析，粗分 CHCl3:CH3OH:H2O不同比例 85:11:1→70:30:5→50:50:0 葡聚糖凝胶：Sephadex LH 20 G（不用） 大孔吸附树脂 Amberlite XAD-2（Pharmacia）D101，RA（北京化工七厂） 四、皂苷的提取与分离 四、皂苷的提取与分离 离心薄层层析（CTLC，Centrifugal thin-layer Chromatography） 闪柱（flash chromatography） Sumple：3.3g 6.0×4cm column silica gel（63～200μm） （Rp material）at a flow rate of 15ml/min 2 bars at the top of the column 低压柱层析（low-pressure liquid chromatography，LPLC） 40～60μm silica gel 10～40μm 硅胶 H（青岛海洋化工厂） Rp 8，Rp 18→Methanol：H2O （9:1; 8:2; 7:3; 6:4; 5:5; 4:6 ) Labar 柱（E. Merk） 40～63μm up to 10 bar 四、皂苷的提取与分离 CHCl3:MeOH:H2O 中压层析（Medium-pressure liquid chromatography，MPLC） 不同的量均可分离 粒径：40～60μm 压力：40 bar 更值得一提的是HPLC的分离条件可直接在MPLC上用 吸附剂：正相（硅胶），*反相（Rp8，18） 溶剂系统：相似于低压柱层析 四、皂苷的提取与分离 高效液相层析（High-performance liquid chromatography，HPLC） semi-preparative HPLC sorberto： 5～30μm 常用： 10～20μm 举例：Rp-8 column（250×16mm） acetonitrile – water（38：62） flow rate：10ml/min 四、皂苷的提取与分离 液滴逆流层析（Droplet countercurrent chromatography，DCCC） 原理：利用皂苷化合物在两相分配系数的不同而得以分开。 样品：极性较大，其他杂质较少。 许多用液固层析难以分离的皂苷化合物，可以用DCCC将他们分开。 常用的溶剂系统——氯仿：甲醇：水（7:13:8） 四、皂苷的提取与分离 皂苷的结构测定包括以下几个方面： 苷元的结构确定 糖链的组成和糖连接的顺序