高效液相色谱串联质谱法直接定量分析植物酵素中多种氨.PDFVIP

２０１５年３月 Ｖｏｌ．３３ Ｎｏ．３ Ｍａｒｃｈ ２０１５ ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ３０９～３１３ 技术与应用 ＤＯＩ：１０．３７２４／ ＳＰ．Ｊ．１１２３．２０１４．１００１０ 高效液相色谱⁃串联质谱法直接定量分析 植物酵素中多种氨基酸成分 １ ３ ２ ２ １ １∗ 郑　 重 ，　 孙　 琦 ，　 石永伟 ，　 曲佳乐 ，　 宋凤瑞 ，　 刘志强 （１． 中国科学院长春应用化学研究所国家质谱中心（长春）＆吉林省中药化学与质谱重点研究室， 吉林 长春 １３００２２；２． 吉林敖东大高酵素有限公司，吉林 延边 １３３７００； ３． 吉林敖东药业集团股份有限公司，吉林 延边 １３３７００） 摘要：利用高效液相色谱⁃串联质谱（ＬＣ⁃ＭＳ／ ＭＳ）方法直接分析植物酵素中多种未衍生化的氨基酸。 样品用甲醇稀 释５倍，超声提取３０ ｍｉｎ，离心１０ ｍｉｎ（速度为 １００００ ｒ／ ｍｉｎ），取上清液分析。 采用色谱柱Ｖｅｎｕｓｉｌ ＡＳＢ Ｃ１８（２５０ × ｍｍ ４６ ｍｍ，５ μｍ）分离，以甲醇⁃乙酸⁃水混合溶液为流动相体系进行梯度洗脱，流速为０５ ｍＬ／ ｍｉｎ，质谱喷雾 电压为３ ｋＶ，离子源温度为１５０ ℃，去溶剂温度３５０ ℃，去溶剂气体流速为８００ Ｌ／ ｈ。 碰撞气氩气的流速保持压力 ２ 为０１７ Ｐａ。 以被测物的提取离子流图峰面积进行定量，该分析方法的线性范围为０５～２００ μｍｏｌ／ Ｌ （ｒ ＞０９９）， 回收率为８６％～１１０％，可对植物酵素中１６种氨基酸成分进行定量分析。 该方法操作简便快速、准确可靠，还适用 于食品、药品及天然产物中多种氨基酸成分的定量分析。 关键词：高效液相色谱⁃串联质谱；未衍生化氨基酸；植物酵素 中图分类号：Ｏ６５８　 　 　 文献标识码：Ａ　 　 　 文章编号：１０００⁃８７１３（２０１５）０３⁃０３０９⁃０５ Ｄｉｒｅｃｔ ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄｓ ｉｎ ｆｅｒｍｅｎｔｅｄ ｂｅｖｅｒａｇｅ ｏｆ ｐｌａｎｔ ｅｘｔｒａｃｔ ｕｓｉｎｇ ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ⁃ｔａｎｄｅｍ ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ １ ３ ２ ２ １ １∗ ＺＨＥＮＧ Ｚｈｏｎｇ ，ＳＵＮ Ｑｉ ，ＳＨＩ Ｙｏｎｇｗｅｉ ，ＱＵ Ｊｉａｌｅ ，ＳＯＮＧ Ｆｅｎｇｒｕｉ ，ＬＩＵ Ｚｈｉｑｉａｎｇ （１．Ｎａｔｉｏｎａｌ ＣｅｎｔｅｒｆｏｒＭａｓｓ Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ ｉｎ Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ ＆ＪｉｌｉｎＰｒｏｖｉｎｃｅＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ ＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄＭａｓｓ Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ，Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，