动物分子生物学结课论文-绿色荧光蛋白基因发现与发展.docVIP

动物分子生物学结课论文 院 系： 生命科学学院 专 业： 动物学 学 号： 0000000 姓 名： 00000 2015年 6月20日  目 录 摘要 1 关键词 1 Abstract 1 Keywords 1 一 绿色荧光蛋白及其发光机理 1 二 GFP基因标记的方式 2 三　GFP的功能 2 四 GFP基因在分子生物学上的应用 3 五 表达绿色荧光蛋白的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌的构建与鉴定 3 六 GFP的应用前景 4 参考文献 5 绿色荧光蛋白发现与发展 摘要来源于海洋多管水母属的绿色荧光蛋白GFP）基因是一种能够在细胞内稳定表达,在蓝光或长紫外光的激发下不需要任何反应底物及其他辅助因子就能发出绿色荧光的新型报告基因无种属、组织和位置特异性且能监测基因表达、信号转导、共转染、蛋白运输与定位以及细胞系谱分类等。GFP对细胞无毒性且检测方法简单结果真实可靠目前在多种原核和真核生物研究中得到广泛的应用。就GFP的生化特性、GFP的改进及其在分子生物学研究中的应用潜力进行简要阐述。关键词绿色荧光蛋白功能应用Discovery and development of green fluorescent protein gene Abstract The green fluorescent protein (GFP) from the sea genus Aequorea can stably expressed in cells and can send the new green fluorescent reporter gene without any reaction substrates and other cofactors under ultraviolet excitation blue or long, it no species, organization and location-specific, and can monitor gene expression, signal transduction, co-transfection, protein transport and localization, and cell lineage classification. GFP not toxic to cells, and the methods is simple to detect the GFP, the dectecttion results are true and reliable, now, it has been widely used in a variety of prokaryotic and eukaryotic studies. Article on the biochemical characteristics, improvement of GFP, and its potential in molecular biology briefly described. Keywords: green fluorescent protein; function; application 一 绿色荧光蛋白及其发光机理 绿色荧光蛋白(Green Fluoeescent Prootein,简称GFP)是一种在美国西北海岸所盛产的水母中所发现的一种蛋白质。这类学名为Aeguorea victoria的水母有着美丽的外表，其存在历史超过1.6亿年。1962年，下村修正是在这种水母的发光器官内发现了大量绿色荧光蛋白。它之所以能够发光，是因为Ser65-Tyr66-Gly67 氨基酸残基形成 4-对羟基苯甲基-5-咪唑啉酮［4-( p-hydroxybenzylidene) -5-imidazolinone，p-HBI］，可自发地形成一种荧光发色团。 当蛋白质链折叠时，这段被深理在蛋白质内部的氨基酸片段，得以“亲密接触”，导致经环化形成咪哩酮，井发生脱水反应。但此时还不能发射荧光，只有当有分子氧存在的条件卜，发生氧化脱氢，方能导致绿色荧光蛋白发色团的“成熟”，形成可发射荧光的形式。上述绿色荧光蛋白发色团的形成过程，系由几位科学家分别研究完成的。 绿色荧光蛋白不仅无毒，而且不需要借助其他辅酶，自身就能发光，可以让利生物学家在分子水平上研究活细胞的动态过程。当绿色荧光蛋白的基因和我们感兴趣的有机体内所拟研究的蛋白质基因相融合时，蛋白质既能保持其原有的活性，绿色荧光蛋白的发光能力也不受影响。通过显微镜观察这种发光的“标签”，生物学家就能做到对蛋白质的位