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生物化学制备实验 2010.05.10 一、主要试剂及用途 DEAE-cellulose DE-32 二乙基氨基乙基-纤维素(DE-32) Sepharose 4B 琼脂糖 4B Sephadex G-25 葡聚糖凝胶 二、基本技术 离子交换层析 亲和层析 SDS三、基本要求 充分预习实验,熟悉基本原理与具体操作过程。 以小组为单位独立操作。 时间:自行安排(11-16周)(必要时统一辅导) 考核:实验结果+基本操作+平时表现 四、参考材料 生化实验教材 辅助材料 * 生物技术系 生命与环境科学学院 (温州大学) 亲和色谱 酶促动力学 纯胰蛋白酶 酶活性测定 酶蛋白含量测定 混合 纯卵黏蛋白(CHOM) 分离纯化 10% TCA提取 鸡蛋清 活化Sepharose 4B 活 化 Sepharose 4B 偶联 CHOM- Sepharose 4B 猪胰脏 胰蛋白酶提取液 激活 胰蛋白酶粗提液 匀浆提取 SDS冷冻干燥 酶制品保存 层析过程:介质溶胀 装柱 平衡 上样 洗脱 搜集 *
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