实验细菌的分离、移植资料.pptVIP

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二、器材 大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、麦康凯培养基、接种环、酒精灯、超净工作台、恒温培养箱等。;补充:(一)接种工具 1.接种针 2.接种环 3.接种钩 4.5.玻璃涂棒 6.接种圈 7.接种锄 8.小解剖刀 ;(二)、无菌操作; 实验台面一律要求光滑、水平。光滑是便于用消毒剂擦洗;水平是倒琼脂培养基时利于培养皿内平板的厚度保持一致。 在实验台上方,空气流动应缓慢,杂菌应尽量减少,其周围杂菌也应越少越好。为此,必须清扫室内,关闭实验室的门窗,并用消毒剂进行空气消毒处理,尽可能地减少杂菌的数量。 ;三、实验内容 1、平板培养基的制备 2、平板划线分离 3、斜面接种法 4、液体接种法 5、细菌生长特性观察; 1、平板培养基的制备;2、平板划线分离(16平板划线.wmv) (1)右手持接种环,将接种环直立灭菌,再横向持棒烧金属柄部分,通过火焰 3-4 次; (2)无菌取样:用接种取斜面培养物或取液体材料、肉汤培养物一环; (3)接种培养平板时以左手掌托平皿,拇指和食指将平皿盖揭开成 20 o ~30 o(角度越小越好,以免空气中的细菌进入平皿中将培养基污染);; (4)将所取材料涂布于平板培养基边缘,然后将多余的细菌在火焰上烧灼,待接种环冷却后再与所涂细菌轻轻接触开始划线; (5)划线时尽量与培养基表面平行,防止划破培养基,划线时不要过多重复,以免形成菌苔,不能得到单个菌落。 划线接种方法如下图: ;;;;;细菌分离培养;3、斜面接种; (1)两试管斜面移植时,左手斜持菌种管和被接种琼脂斜面管,管口互相并齐,管底部放在拇指和食指之间 ;(2)右手持接种环,灭菌后,用右手小指和无名指下部近掌背处拔出一管棉塞,无名指和中指下部近掌背处拔出第二管棉塞,将管口进行火焰灭菌; 将管口进行火焰灭菌,将接种环伸入菌种管内,先在无菌生长的琼脂上接触使冷却,再挑取少许细菌后拉出接种环立即伸人另一管斜面培养基上,勿碰及斜面和管壁,直达斜面底部,从斜面底部开始划曲线,向上至斜面顶端为止,管口通过火焰灭菌,将棉塞塞好。; (3)??种完毕,接种环通过火焰灭菌后放下接种棒,最后在斜面管壁上注明菌名、日期,置37℃温箱中培养。;4、液体接种法;5、细菌生长特性观察;;四、思考和作业题 P218第1-3题, 并上交实验报告。

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