第十八章支原体pptPPT.ppt

第十八章支原体、 衣原体、立克次体 ; 支原体科分支原体属和脲原体属两个属。对人致病的主要为肺炎支原体、人型支原体、生殖器支原体、穿通支原体和溶脲脲原体。除此之外，支原体还经常污染细胞培养，给实验室病毒分离、单克隆抗体制备等工作带来一定困难。;一、肺炎支原体; 是青少年急性呼吸道感染的主要病原体，表现为上呼吸道感染综合征，占非细菌性肺炎的1／3以上。过去认为是温和的病原体，现在认为它也可引起严重的双侧肺炎和其他系统的肺外并发症，如心肌炎、心包炎、免疫性溶血性贫血、肾炎等。 ;微生物特性; 2.抗原结构 来自细胞膜，胞膜外层蛋白质是主要抗原， 常用生长抑制试验(GIT)与代谢抑制试验 (MIT)鉴定。GIT是将吸有型特异性抗血清 的滤纸片置于接种有支原体的固体培养基上， 经孵育出现同型血清抑制该型支原体生长现 象。MIT是将支原体接种在含有抗血清培养 基中，若抗体与支原体型一致，则抑制该支 原体不能分解葡萄糖产酸。此两种方法可将 支原体分成若干血清型。;5.抵抗力;检验程序;4.分离培养;5．抗体检测;(2)补体结合(CF)试验;(3)间接血凝试验;(4)冷凝集试验;二、解脲脲原体;1.寄居泌尿生殖道，传播途径为性接触和母婴传播。致病机制与侵袭性酶有关。吸附后产生磷脂酶分解胞膜中的磷脂，脲酶分解尿素产氨，影响宿主细胞生物合成。产生IgA蛋白酶，破坏IgA的局部抗感染作用，有利于粘附和致病。;2.引起非淋菌性尿道炎(NGU) ，上行感染，可引起前列腺炎或附睾炎；阴道炎和宫颈炎，并可导致流产。因为与人精子膜有共同抗原，对精子可造成免疫损伤而致不育。;微生物特性;2．培养特性;3.抗原构造;4．抵抗力;微生物检验; 2．标本直接检查 ;(2)ELISA 可测定血清型别，还可测出Ig的类型(IgM、IgG)，较敏感、特异性强，有诊断意义。 (3)免疫斑点试验(IDT) 检测抗原提取物和培养物。此法敏感，特异性，不需特殊仪器，易于推广，可作为临床感染者病原检查的特异诊断方法。;3．分离与鉴定;经形态和生化反应等检测可作出初步鉴定。只分解尿素，不分解葡萄糖和精氨酸。用特异抗血清作MIT和GIT作进一步鉴定。 ;三、穿通支原体 ;为杆状，一端为尖形结构。营养要求高，菌落呈荷包蛋样，生长较慢，初代多在10天以上，发酵葡萄糖，水解精氨酸，但不分解尿素，液体培养基生长时无明显混浊或沉淀。 对红霉素、四环素、林可霉素敏感，但对青霉素不敏感。 ;微生物检验;3.鉴定;代谢抑制试验(MIT);PCR;抗体检测;第二节 衣 原 体 ;一、沙眼衣原体;1．沙眼亚种;(2)包涵体结膜炎： 由B、Ba、D、Da等血清型引起。婴儿通过 产道感染，引起滤泡性结膜炎，不出现角 膜血管翳。 (3)泌尿生殖道感染： 由D-K血清型引起。在性接触传播引起的 非淋菌性泌尿生殖道感染（50％—60％）。 易发展为持续感染或无症状携带者。 ;2.性病淋巴肉芽肿亚种，由L血清型引起性病淋巴肉芽肿。侵犯腹股沟淋巴结，引起化脓性淋巴结炎和慢性淋巴肉芽肿。 3.鼠生物变种为鼠间传播，不侵犯人，与鼠肺炎有关。 ;微生物特性;抗原结构;培养特性;抵抗力; 沙眼和包涵体结膜炎病人，用拭子在结膜上穹窿涂擦或取结膜刮片。性病淋巴肉芽肿：采淋巴结脓汁，也可取直肠拭子或活检材料送检。 用光学显微镜观察包涵体有诊断意义，特别在眼结膜、尿道及子宫颈上皮细胞内发现典型包涵体更有沙眼衣原体感染的参考。;免疫学方法;核酸检测;分离培养;鸡胚培养;鉴定;抗体检测;三、鹦鹉热衣原体;抗原检测;核酸检测;分离培养;(3)细胞培养：细胞培养常用PL细胞、BHK细 胞、Vero细胞等，鹦鹉热衣原体均能生长。 但直接用于临床标本的分离培养效果不好， 最好先接种鸡胚卵黄囊，经繁殖后再细胞培 养容易成功。 ;抗体检测;四、肺炎衣原体 ;微生物特性;抗体检测;第三节 立克次体 ;共同特点;一、斑疹伤寒立克次体 ;莫氏立克次体;致病物质;(二)微生物特性;3.有群特异性和种特异性两种抗原。大部分立克次体与普通变形杆菌X菌株的菌体耐热多糖抗原有共同的抗原性，故可用这些菌株代替立克次体抗原进行凝集反应去检测抗体，这种交叉凝集试验被称为外斐反应，可供辅助诊断。; 外斐反应 ;(三)微生物检验;2.标本直接检查;引物R17-1、-2在65℃条件下能扩增普氏和莫氏立克次体DNA。在琼脂凝胶上产生一条340bp的核酸带； 引物R169-1、-2仅能扩增普氏立克次体DNA，产生一条432bp的核酸带。两种引