免疫诊断防治PPT.ppt

免 疫 诊 断 P241; ;(二)抗原或抗体的检测方法： 1.凝集反应： 颗粒性抗原(细菌、红细胞等)与相应抗体结合，在有电解质存在时，比例适当，形成肉眼可见的凝集团块。;直接凝集反应;（2）间接凝集：载体颗粒（RBC、乳胶等） 间接凝集：包被已知抗原，如Coombs test 反向间接凝集：包被已知抗体 ;间接凝集抑制反应：妊娠乳胶试验(HCG);原理: 检测抗原;;（2）双向免疫扩散：;(3)对流免疫电泳：;（4）免疫电泳 原理：电泳后双扩;3.免疫标记技术： 标记物：荧光素、酶、放射性核素等 特点：敏感性高，定性、定位、定量;（1）免疫荧光法： FITC、PE;;（2）酶免疫测定：HRP、AP *酶免疫组化法： 测定组织中或细胞表面抗原 *酶联免疫吸附试验（ELISA）： 测定可溶性抗原或抗体;ELISA原理： 将已知抗原或抗体吸附于固相载体（聚苯乙烯微量反应板）表面，使抗原抗体反应在固相表面进行，用洗涤液将游离成分洗去。;方法： *双抗体夹心法： 检测抗原;*间接法： 检测抗体 ;*生物素-亲和素系统（BAS）ELISA： 生物素标记抗体，酶标记亲和素;（3）放射免疫测定法（RIA）： 131I、125I标记，微量物质测定;（4）免疫印迹Western Blot;稀释的抗凝血;淋巴细胞亚群的分离与鉴定： 尼龙毛分离法： E花结实验：;利用表面标志分离淋巴细胞亚群;流式细胞术： ;Lc功能测定： 1.淋巴细胞增殖/转化试验： 原理： 有丝分裂原等非特异刺激T、B细胞向淋巴母细胞转化、增殖。 方法： MTT法：;氚标记的胸腺嘧啶核苷;2. T细胞介导的细胞毒试验：CTL;3. B细胞溶血空斑实验：;溶血空斑;免 疫 预 防 ;一、人工主动免疫;灭活疫苗和减毒活疫苗的特性比较 ;（二）新型疫苗： 1．亚单位疫苗：保留有效免疫原成分 2．结合疫苗：TI-Ag+载体→TD-Ag 3．合成肽疫苗： 4．基因工程疫苗： 重组抗原疫苗： 重组载体疫苗： DNA疫苗: 转基因植物疫苗：;二、人工被动免疫 ;（二）人免疫球蛋白制剂 1.丙种球蛋白： 紧急预防甲肝、麻疹、脊髓灰质炎 2.人特异性免疫球蛋白： 如抗乙肝病毒免疫球蛋白 （三）细胞因子制剂：IL-2、IFN等 （四）单克隆抗体制剂：; ;免疫治疗;（一）抗原类制剂：疫苗、瘤苗、自身抗原 （二）抗体类制剂 1.免疫血清： 2.抗淋巴细胞丙种球蛋白： 3.抗肿瘤抗体制剂：靶向治疗 常用细胞毒物质：放射性核素、化疗药物、毒素 存在问题： 鼠源性抗体；对实体肿瘤穿透力差；特异性不高。 4.抗细胞因子抗体：如用抗IL-1治疗RA。;（三）免疫细胞类制剂： 1．造血干细胞移植：骨髓移植、脐血转输 2．过继免疫疗法： CIK：cytokine induces killer cells.细胞因子诱导的杀伤细胞。主要源于NK（外周血淋巴细胞）。 TIL：tumor infiltrating lymphocytes,肿瘤浸润性淋巴细胞。源于实体瘤组织，更强的杀伤活性。;（四）生物应答调节剂： BRM，具有促进或调节免疫功能的制剂，通常对免疫功能正常者无影响，对免疫功能异常尤其是免疫功能低下者有促进和调节作用。 1.BCG、短小棒杆菌、细菌或真菌的多糖成分 2.胸腺肽： 3.转移因子： 4.免疫核糖核酸：;（五）免疫抑制剂： 化学合成：环磷酰胺，硫唑嘌呤 微生物制剂： 环孢素或环孢菌素CsA；FK-506；雷公藤制剂;;APC;作用：以IgG为代表: ;复习思考题; 下周上试验课（ 在东5楼） 必须穿工作服，带实习指导 历时4周 试验成绩15分