使用新型放大增强方法实现生物医学组织样品的高空间分辨-Agilent.PDF

使用新型放大增强方法实现生物医学 组织样品的高空间分辨率 FTIR 成像 应用简报 生物医学 作者 1 2 Mustafa Kansiz , Carol Hirschmugl , Benedict Albensi3 4 , Catherine Liao , Kathleen Gough4 1 安捷伦科技澳大利亚有限公司，澳大 利亚马尔格雷夫 2 威斯康星大学物理系，美国密尔沃基 3 圣博尼费斯医院研究中心神经退行性 前言 疾病部门，加拿大温尼伯 傅立叶变换红外 (FTIR) 成像是一项成熟的分析方法，可同时获得微米级范围的光 4 谱和空间信息。这一技术已广泛用于多种不同的应用领域，从高分子科学到生物 曼尼托巴大学化学系，加拿大温尼伯 医学成像。近年来，人们越来越关注通过主要使用基于同步加速器的系统，来提 高受到衍射极限制约的 FTIR 成像系统的空间分辨率。 在本应用简报中，我们展示了一项使用现有物镜实现放大增强的新型方法。最 终，我们的 FTIR 系统显示出 1 µm/像素级别的高空间分辨率成像能力。独特的 是，这种构造在设置不同的放大倍率时不需更换物镜，从而保持了常规物镜相对 较大的工作距离（约 21 mm ）。 为评估和比较新方法的性能，我们分别使用标准放大倍率 生物医学样品 FTIR、高放大倍率 以及多光束同步加速器 对生物 我们从 10 个月的三重转基因 (3xTg) 小鼠脑部取得了 7 µm FTIR FTIR 医学样品（未固定的鼠脑冷冻切片）进行 FTIR 成像分析 [1] 。 厚的脑冷冻切片，并将其放置于 BaF2 窗片上。3xTg 小鼠 携带有特定的基因突变，导致其脑中形成淀粉样蛋白斑块， 实验部分 这是阿尔茨海默氏病的特征（表 2 ）。实验动物的处死方案 遵循加拿大实验动物管理委员会建立的指导原则，并经过曼 仪器 尼托巴大学和多伦多大学的管理审查委员会核准认可。 我们将安捷伦科技公司的 Cary 670 FTIR 光谱仪和带有高能 量碳化硅棒光源的 Cary 620 FTIR 配合使用，分别在标准放 表 2. 3xTg 小鼠模型中的突变基因 大和高倍放大条件下采集数据。为进行比较，我们还使用 了配备有多光束同步加速器 (IRENI) 光源的非安捷伦 FTIR 瑞典突变型 (K670N/M671L) APP 成像系统采集数据 [1] 。 早老素 PS1 突变 (M146V) 人类四重复序列 Tau 蛋白突变 P130 每种技术的操作参数列于表 1 。 表 仪器操作条件 1. 参数