Q型烟粉虱化学感受蛋白基因BtabCSP1的克隆与分析-中国农业科学.PDF

中国农业科学 2012,45(18):3892-3898 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2012.18.022 Q型烟粉虱化学感受蛋白基因 BtabCSP1 的克隆与分析 白润娥，李静静，唐雅菲，熊大斌，李帅良，闫凤鸣 （河南农业大学植物保护学院，郑州450002 ） 摘要：【目的】克隆 Q 型烟粉虱（ Bemisia tabaci）化学感受蛋白基因，分析其序列特征和表达特性，为深 入研究该类基因功能奠定基础。【方法】根据桃蚜化学感受蛋白OS-D2a（ABM5558）的氨基酸序列，借助生物信息 学搜索烟粉虱EST序列拼接了 1个烟粉虱化学感受蛋白基因（BtabCSP1），以烟粉虱mRNA 为模板，采用RT-PCR 扩 增克隆烟粉虱化学感受蛋白cDNA。采用半定量RT-PCR对不同发育阶段的烟粉虱样品中 BtabCSP1 的表达模式进行 研究。【结果】 BtabCSP1 完整阅读框全长为 2 626 bp，包含 2 个外显子和 1 个内含子，编码 131 个氨基酸残基， 其中含有1个CX6CX18CX2结构域，为化学感受蛋白的典型特征。BtabCSP1 在供试样品中均有表达，并且在2 龄、 3 龄和伪蛹阶段表达量更高。聚类分析结果表明，烟粉虱与果蝇、桃蚜等物种遗传关系较远，化学感受蛋白基因 在物种进化过程中较为活跃。【结论】从 Q 型烟粉虱若虫中克隆了 1 个化学感受蛋白基因 BtabCSP1，该基因在烟 粉虱不同发育阶段中均能表达，推测其对烟粉虱的生长发育具有重要的调控作用。 关键词：Q型烟粉虱；化学感受蛋白；基因克隆；特征分析 Cloning and Characteristics Analysis of Chemosensory Protein Gene BtabCSP1 in Bemisia tabaci Q Biotype BAI Run-e, LI Jing-jing, TANG Ya-fei, XIONG Da-bin, LI Shuai-liang, YAN Feng-ming (College of Plant Protection, Henan Agricultural University, Zhengzhou 450002) Abstract: 【Objective 】 The objective of this study is to clone the full length cDNA of the gene encoding chemosensory proteins from Bemisia tabaci Q biotype, and to analyze its expression pattern at different developmental stages. 【Method 】Based on the amino acid sequence of aphids (Myzus persicae) chemosensory proteins OS-D2a (ABM5558) reported previously, a pair of primers were designed based on simulation of gene splicing and RT-PCR was used to clone the chemosensory protein gene BtabCSP1. 【Result 】Seq