链球菌溶血素O的基因克隆原核表达及在胶乳增强透射比浊法测ASO.PDFVIP

链球菌溶血素O 的基因克隆、原核表达 及在胶乳增强透射比浊法测ASO 试剂盒的开发应用 摘要 目的：以乙型溶血性链球菌A 群菌株总DNA 为模板，通过PCR 扩增得到链球菌溶血素O （SLO ）基因片段，与表达载体连接后转化大肠杆菌BL21(DE3)进行可溶性表达，目的蛋白 纯化后用于胶乳增强透射比浊法测ASO 试剂盒的开发应用。 结果：SDS分析表明SLO 能够在大肠杆菌中进行可溶性表达，纯化后的重组SLO 蛋 白纯度﹥95% 。Western Blot 检测显示重组SLO 能与ASO 高值血清有特异的免疫反应。纯 化后的重组SLO 包被本公司生产的胶乳颗粒制成ASO 胶乳增强透射比浊试剂盒，并与市售 同类试剂上BeckmanAU480 自动生化分析仪做41 份临床血清标本检测比对，结果显示两者 之间有良好的相关性。 结论：成功构建了稳定、高效可溶性表达重组SLO 蛋白的基因工程菌株，工程菌表达的重 组SLO 能用于胶乳增强透射比浊法测ASO 试剂盒的开发。 关键词：链球菌溶血素O ；原核表达；胶乳增强透射比浊；ASO 链球菌溶血素O （SLO ）是由一种化脓性球菌分泌的蛋白，它可刺激人体产生SLO 抗 [1]