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九 发酵供氧
第九章 发酵供氧 重点:微生物的需氧和溶解氧的控制;供氧与微生物呼吸及代谢产物的关系;微生物的临界氧浓度;气体溶解过程的双膜理论;影响氧传递速率的主要因素;溶氧系数的测定; 难点:气体溶解过程的双膜理论 第一节 微生物的需氧和溶解氧的控制 一、供氧与微生物呼吸代谢产物的关系 微生物方面来看,供氧对需氧微生物是必不可少的,在发酵过程中,必须供给适量的无菌空气,菌体才能繁殖和积累所需要的代谢产物,不同菌种及不同菌龄、不同发酵阶段所需的氧是不同的。 不同好氧微生物所含的氧化酶(包括过氧化氢酶,细胞色素氧化酶,黄素脱氢酶,多酚氧化酶等)的种类与数量不同,导致不同微生物的吸氧量与呼吸程度不同。 一般微生物的吸氧量为25~100mmol O2/(L·h),但也有个别菌很高。 常用呼吸强度和耗氧速率两种方法来表示微生物的吸氧量。 呼吸强度:指单位重量的干菌体在单位时间内所吸取的氧量,QO2 ,单位为mmolO2/g干菌体·h。 耗氧速率:指单位体积培养液在单位时间内的吸氧量,r,单位为mmolO2/L·h。 二者关系:呼吸强度表示微生物的绝对吸氧量,但当培养液中有固体成分存在时,测定有困难,可用耗氧速率表示。 r= QO2 · X X—发酵液中菌体的浓度(g/L) 二、微生物的临界氧浓度:C临界 是指微生物进行某种生理活动时,对环境中氧浓度的最低要求,与最适氧浓度概念是相区别的。 不同种类的微生物的C临界不同,同种微生物在进行不同生理活动时C临界也不同。 在培养过程中不需要使溶解氧浓度达到或接近饱和值,而只要超过某一临界氧浓度即可。 当不存在其他限制性基质时,如果溶氧浓度高于临界值,细胞的比耗氧速率保持恒定; 如果溶氧浓度低于临界值,细胞的比耗氧速率大大下降,这时细胞处于半厌氧状态。 三、发酵过程中溶解氧的变化 1、每种产物发酵的溶氧浓度变化都有自己的规律。 如图9-2,Glu发酵正常与异常的溶氧曲线,明显下降段:需氧量超过供氧量,使溶氧浓度明显下降,出现一个低峰,产生菌的摄氧率出现高峰。发酵液中的菌浓也不断上升。粘度一般在这个时期也会出现一高峰阶段。这都说明微生物正处在对数生长期。 过了生长阶段,需氧量有所减少,溶氧浓度经过一段时间的平衡阶段或上随之上升后,就开始形成产物,溶氧浓度也不断上升。低峰出现的时间和低峰溶氧浓度随菌种、工艺和设备供氧能力不同而异。 发酵中后期,对于分批发酵,溶氧浓度变化比较小。菌体已进入静止期,呼吸强度变化不大。 在生产后期,菌体衰老,呼吸强度减弱,溶氧浓度逐步上升,菌全自溶,溶氧浓度会明显上升。 2、发酵过程中比耗氧速率的变化: 对数生长初期,比耗氧速率达到最大值,但此时细胞浓度低,摄氧率并不高。随着细胞浓度的迅速增高,培养液的摄氧率增高,在对数生长后期达到峰值。 对数生长阶段结束,比耗氧速率下降,摄氧率下降。 基质耗尽,细胞自溶,摄氧率使迅速下降。 3、溶氧可作为发酵异常的指示 1)??发酵中污染好气性杂菌:发酵2~3小时时溶解氧迅速下降; 2)??污染噬菌体:菌液变稀,溶氧回升; 3)??操作故障或工艺错误引起的发酵异常,如搅拌异常等。 发酵过程中引起溶氧异常下降的原因 1)??污染好气性杂菌,大量溶氧被消耗 2)??菌体代谢发生异常,需氧要求增加 3)??某些设备或工艺控制发生故障或变化,如搅拌功率消耗变小或搅拌速度变慢;消泡剂加入过多 4)??影响供氧的工艺操作如停止搅拌、闷罐等。 四、溶解氧控制的意义 微生物只能从其生活的液体基质中获得氧,以供其生理活动。发酵液中所含氧的多少就显得很重要。氧是难溶气体,在25℃、100MPa下,氧在纯水中的溶解度为0.25mmol/L,只够微生物正常呼吸20-30秒,为满足发酵中菌体对氧的需求,必须采用强制供氧措施;另一方面,由于氧有时又可改变菌体的代谢方向,故又需要根据生产需要适时地调节控制供氧,这需要根据具体的发酵工艺而定。 目前发酵工业大都采用好氧菌,氧的传递速度成为发酵生产中的限制因素。 发酵工业上氧的利用率很低。如抗生素发酵,被微生物利用的氧不超过经过净化处理的无菌空气中含氧量的2%;在谷氨酸发酵方面氧的利用率为10%~30%。 第二节 传质理论 氧从空气经过一系列复杂的途径,最终被传递到菌体内呼吸酶所在的位置上才能被利用。 供氧指空气中的氧气从空气泡里通过气膜、气液界面和液膜扩散到液体主流中。 耗氧指氧分子自液体主流通过液膜、菌丝丛、细胞膜扩散到细胞内。 氧从气泡传递到细胞内要克服一系列的阻力,其大小取决于流体力学特性、温度、细胞活性和浓度、液体的组成、界面特性以及其他因素。 一、传递
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