糖尿病动物模型原理及方法STZ诱发糖尿病动物模型原理-中国试剂网.PDFVIP

中国试剂网 2.5.46 糖尿病动物模型原理及方法 STZ 诱发糖尿病动物模型原理如下: STZ 对一定种属动物的胰岛 β细胞有选择性破坏作用，能诱发许多动物产生糖尿 病，一般采用大鼠和小鼠制造动物模型。国外有学者报道选用雄性大鼠制造模型 的成模率明显高于雌性大鼠。1 型糖尿病与 2 型糖尿病动物模型的制备与 STZ 注 射的剂量有关系：大剂量注射时，由于直接引起胰岛 β细胞的广泛破坏，可造成 1 型糖尿病模型；而注射较少量 STZ 时，由于只是破坏一部分胰岛β细胞的功能， 造成外周组织对胰岛素不敏感，同时给予高热量饲料喂养，两者结合便诱导出病 理、生理改变都接近于人类 2 型糖尿病的动物模型。 造膜前的喂养 ： Ⅰ型糖尿病模型成模比较快，通常大鼠在普通饲料适应性喂养 2 周后即可开始造 模 Ⅱ型糖尿病模型：高脂饮食诱导加小剂量STZ。造模前喂以高脂(高糖)饲料，诱 发出胰岛素抵抗。 高脂(高糖)饲料 ： 高脂(高糖)饲料成分：其中含 10 蔗糖，10 猪油，5 胆固醇 由基础鼠饲料加蔗糖、炼猪油和蛋黄按比搭配制作高脂高糖饲料：其比例为猪油 18 ,蔗糖 20 ,蛋黄 3 ,基础饲料 59 。 预实验的重要性 ： 很重要。实验时 STZ 的给药量应参照预实验的结果，尽量不要盲目按照文献上 或他人的给药量来直接使用，鼠均重和空腹(低糖状态)抗药力、禁食时长、注射 选时、以及之前饲养过程、测糖选时等都不相同，通过预实验来确定符合自己实 验鼠的给药计量，才是最科学的。 常用给药剂量 ： Ⅰ型糖尿病模型：大鼠剂量为70～65mg/Kg Ⅱ型糖尿病模型：高糖高脂喂养1～2 个月的大鼠,STZ 剂量在 25～40mg/Kg 或参考文献（鼠均重不同，本剂量以 200 克均重为例）。 配置 STZ 液 ： 柠檬酸缓冲液的配制： 中国试剂网 2.5.46 柠 檬 酸(FW:210.14) 2.1g 加入双蒸水 100mL 中配成A 液 柠檬酸钠(FW:294.10)2.94g 加入双蒸水 100mL 中配成B 液 链脲佐菌素配制液：用时将 A 、B 液按一定比例混合（1：1.32 也有按 1:1 的）， PH 计测定 ph 值,调节 ph=4.2-4.5, 即是所需配置 STZ 的柠檬酸缓冲液。 注射时用柠檬酸缓冲液以 1 的浓度溶解 STZ，按空腹体重注射相应的 STZ， 在 30 分钟内注射完毕。★ STZ 容易失活, STZ 快速称取后仍要求干燥避光，推荐 用干燥铝箔(或锡箔)纸。 能否使用其他溶液配置缓冲液 ： 可以。但我们推荐使用柠檬酸。例如用醋酸等溶液，也可以做出，但其 PH 值不 好控制，而 STZ 只有在 PH4.2-4.5 的时候才具有最佳药力活性。 禁食和血糖的联系 ： 禁食 12 小时以上(一般过夜禁食，不禁水) 。禁食的时间越长，STZ 对胰岛 β细 胞的破坏力越明显，即药效越高。所以相对禁食时间延长，可以降低 STZ 的用 量。 腹腔注射和尾部注射的区别 ： 尾部注射即静脉注射，药物利用率较高，同比腹腔注射，可以节省药量，缺点是 操作起来不如腹腔注射方便。 注射前有那些操作步骤？ 过夜禁食后称重，按大鼠总重量比称取 STZ，放一干燥灭菌瓶内，外用锡纸包好， 将柠檬酸缓冲液及装 STZ 的瓶子置冰浴，一起带到动物房，如果注射操作技术 不熟练,应两组交替注射，建议分组溶解 STZ，比如 10 只或 15 只鼠/组。 注射时，推进速度和血糖的关系 推注的速度快，更容易形成高血糖，推注的速度慢，相对的危险性较低，但也不 容易成模，常规操作中多要求快速注射。当然，STZ 的剂量是决定血糖高低的主 要因素。 死鼠问题的解决 鼠的个体差别和空腹(低血糖)抵抗力的差异而致死亡率的不同，开始死亡率高可 能主要是血糖突然升高, 鼠不适应,或发生了 DKA( 即酮症酸中毒) 。 首先，一定要保证足够的饮水量(饮水量不足容易导致死鼠); 中国试剂网 2.5.46 其次，高血糖和低血糖都会