MTT试验.docVIP

MTT试验通过结果可以得出： 只有细胞数目在一定的范围内，细胞数与吸光度值之间才有正相关关系生长曲线才能是直线上升。 种植的细胞数目太低，致使形成甲臢的数目上看不到差别，种植数目太高，细胞之间竞争营养，生长状态会不太好，细胞活性降低，导致细胞数目与OD值不成比例。吸光度值的高低能够放映活细胞的数目，及细胞的活性 。定量PCR 是以扩增产物的指数增长为基础, 由扩增产物的量来确定初始靶基因量的核酸定量方法, 扩增产物的指数范围取决于DNA 初始模板量的浓度、聚合酶、dN TP、M g2+ 、引物的浓度变性退火和延伸的条件、循环次数和循环的时间以及标本的处理等因素。同样, 先使mRNA 逆转录成cDNA , 再用同样方法定量时, 除上述的影响因素外, 还有逆转录酶活性、逆转录效率的差异等问题, 故定量PCR 的关键问题是能做到将上述因素严格统一化, 使不同标本的定量结果具有可比性。目前PCR 定量研究较多的方法是以B act in或GA PDH 作为对照〔1〕, 主要是基于B act in 或GA PDH 的mRNA 在生理或在病理条件下转录水平不发生任何变化, 故可用它们的mRNA 水平相对于其它基因mRNA 水平的改变来反映生理或病理 条件对其它基因mRNA 水平的影响。但这种方法仍存在一些不足, 如实验条件可以改变作为对照的B ac