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基因分析仪在农业领域的应用.pdf
ABI基因分析仪在农业领域的应用
现场应用技术支持, Life Technologies, China
技术支持热线: 8008208982/4008208982
1 | Life Technologies™ Proprietary and Confidential 1/10/2014
测序技术发展
第一代测序平台
第二代测序平台
第三代测序平台
AND MORE……
2 | Life Technologies™ Proprietary and Confidential 1/10/2014
测序类别 代表性测序平台 特点
一代测序 经典Sanger法测序原理，应用最广泛的测序平台
（90年代中期实 ABI 3730 ，3500 等 单次可测400bp甚至1kb以上的片段
现自动化测序） 适合一个或几个基因的检测与验证, 是基因测序的“金标准”
Roche 454
二代测序 光学检测原理，测序速度慢，成本较高
illumina Hiseq/Miseq
（2005年） 适合指标数多的检测（同时检测几百至几万个基因）
ABI SOLiD
氢离子检测原理，无需光学设备
三代测序
Ion Torrent, PacBio 测序速度快，试剂及设备成本低，实验操作及数据分析简单
（2010年）
适合指标数多的检测（同时检测几十、几百甚至几万个基因）
3 | Life Technologies™ Proprietary and Confidential 1/10/2014
Sanger测序法的优势
Sanger 测序因其准确性、可靠性和易用性成为基因测序领
域的“金标准”
实验操作简便，实验流程非常成熟
数据分析容易，配套分析软件
基于Sanger法发展起来的毛细管电泳平台拓展性强 不仅
仅会测序，而且胜任片段分析，应用范围更广。
4 | Life Technologies™ Proprietary and Confidential 1/10/2014
Sanger法（DNA测序）基本原理
5 | Life Technologies™ Proprietary and Confidential 1/10/2014
测序原理–双脱氧末端终止法
5’
O
O
无3’ OH的ddNTP阻止下一个dNTP的掺入
O
5’
3’ H
O
6 | Life Technologies™ Proprietary and Confidential 1/10/2014 3’ OH
测序原理–双脱氧末端终止法
变性
DNA模板
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