【精品文档】临床基因扩增检验的质量保证(新 - 临床聚合酶链反应测定的质量保证.ppt

室内质控的局限性 IQC可确保每次测定与确定的质量标准一致，但不能保证在单个的测定样本中不出现误差。比如样本鉴别错误、样本吸取错误、结果记录错误等。此类误差的发生率在不同的实验室有所不同，一般要求小于0.1%，且应均匀地分布于测定前、测定中和测定后的不同阶段。 * 影响临床基因扩增检验结果的最关键因素 产物“污染”（Carry-over) 测定人员的操作：标本混淆；贴错标签、核酸提取等 试剂 * 避免基因扩增检验假阳性结果的措施 严格的实验室分区； 使用带“滤心”的吸头； 设立“阴性”质控（与标本同时处理）； 使用防“污染”（含UNG）的PCR试剂； 临床“假阳性”问题：病原微生物如结核杆菌经药物治疗后已死亡，但PCR仍可为阳性，故治疗结束后至少两周内不宜做PCR检测。 * 避免基因扩增检验假阴性结果的措施 避免由于来自于标本的血红蛋白、肝素、某些激素或来自标本处理中的去垢剂、有机溶剂的抑制作用的措施：纯化核酸；标本重复双份测定；稀释标本。 使用“内质控”（Internal Control,IC)以避免由于试剂、扩增仪或标本处理不当所致的假阴性；须注意的是，如果靶浓度很高，可致在靶核酸和IC之间产生竞争，而使IC受抑制，此时IC可为阴性。 * 室间质量评价（EQA） IQC确保实验室室内测定质量的一致性，而EQA则提供将实验室测定情况与一室间和客观标准进行回顾性比较的数据。